潘一钊，马君梅，黄坚坚，胡志妍，梅虹霞，林函，

    (温州医科大学附属第二医院育英儿童医院，浙江 温州 325027，1.麻醉与围术期医学科；2.浙江省麻醉学重点实验室)

    手术刺激会导致血浆糖皮质激素水平升高，直至术后第8天糖皮质激素水平才恢复正常，糖皮质激素浓度过高会损害神经发育并持续存在[1]。神经干细胞(neural stem cells，NSCs)作为神经元的前体细胞，可以促进缺氧缺血损伤模型中受损的新生儿脑中的神经前体细胞迁移和分化，促进感觉运动功能的恢复[2]。而糖皮质激素暴露之后受损的神经细胞没有因神经干细胞再生修复，因此我们考虑糖皮质激素暴露直接引起NSCs的发育受损。

    右美托咪定(dexmedetomidine，DEX)为肾上腺α-2受体激动剂，具有神经保护作用，呈剂量相关性减轻七氟醚、异氟醚暴露造成的神经细胞损伤[3-4]， 且DEX对氯胺酮造成的NSCs损伤有保护作用，但未见有关于DEX在皮质酮(corticosterone，CORT)暴露模型上是否具有保护作用的研究[5]。本研究采用CORT诱导NSCs损伤模型，探讨DEX对NSCs的保护作用及机制。

    1 材料和方法

    1.1 试剂和仪器 DMEM/F12和B27 supplement购自美国Gibco公司；碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)和表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)购自美国Peprotech公司；CytoTox 96非放射性细胞毒性试剂盒购自美国Promega公司；Matrigel购自美国BD公司；CORT购自美国MCE公司；DEX购自江苏恒瑞医药股份有限公司。Click-iTTMEdUAlexa Fluor高通道显像试剂盒、Trizol购自美国Invitrogen公司；小鼠神经上皮干细胞蛋白巢蛋白(Nestin)和兔胚胎干细胞关键蛋白(SRY-related HMG-box2，SOX2)抗体购自美国Abcam公司；兔GSK3-β抗体、兔p-GSK3-β抗体、兔β-catenin抗体、兔Cyclin D1抗体购自美国CST公司；兔β-Tubulin抗体购自美国Proteintech 公司；反转录试剂盒RR037A购自大连宝生物工程有限公司；鼠抗兔二抗购自上海碧云天公司 ......