蔡学定，陈马云，李文雅，吴佩亮，姚丹，黄晓颖

    (温州医科大学附属第一医院 呼吸与危重症医学科，浙江 温州 325015)

    肺动脉高压(pulmonary hypertension，PH)是一种以肺血管收缩与结构重塑为特征的慢性进展性疾病，病死率高[1]。肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells，PASMCs)的异常增殖是肺血管结构重塑的主要原因，而多种炎症反应参与其中[2-3]。目前已有研究探明姜黄素可通过Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3， NLRP3)炎性体相关通路调节炎症反应[4]。姜黄素是否在低氧性肺动脉高压(hypoxia induced pulmonary hypertension，HPH)疾病模型中通过NLRP3炎性体相关通路抑制炎症反应从而抑制HPH未见报道。本研究通过建立HPH大鼠模型和低氧PASMCs模型，探讨姜黄素通过NLRP3/Caspase-1/IL-1β轴对HPH的作用机制。

    1 材料和方法

    1.1 材料 SPF级健康雄性SD大鼠，购于上海斯莱克公司，体质量200～300 g，动物模型实验在温州医科大学实验动物中心进行，实验动物许可证号：SYXK(浙)2019-0009。DMEM高糖培养基、0.25% EDTA胰酶、胎牛血清、青/链霉素购于美国Gibco公司。RIPA裂解缓冲液、BCA蛋白定量检测试剂盒、蛋白酶磷酸酶抑制剂、ECL超敏化学发光底物购于美国Thermo Pierce公司。姜黄素单体购于德国Merck公司。兔源性NLRP3抗体、兔源性Caspase-1抗体、兔源性IL-1β抗体购于英国Abcam公司。

    1.2 动物分组及造模 将18只SD大鼠随机分为3组(每组6只)：常氧组(N)、低氧组(H)、低氧+姜黄素组(HC)。N组大鼠均置于SPF环境中；H组大鼠造模时被放置于密封的低氧舱内，通过动态充入N2使舱内的O2浓度保持在9%～11%，在自动控制器的作用下将湿度维持在55%～65%，CO2控制在2%以下，低氧造模低氧时间为每日8 h，共造模4周。HC组大鼠进入低氧舱造模前，腹腔注射40 mg/kg姜黄素 ......