恒温扩增技术在男性淋球菌性尿道炎病原菌RNA检测中的应用
灵敏度,尿液,1资料和方法,2结果,3讨论
戴显宁,童郁,林建萍,施建有,陈璐,许锴(温州市人民医院 检验科,浙江 温州 325000)
淋病奈瑟菌(n.gonorrhoeae,NG)又称淋球菌,为严格的人体寄生菌,常寄存于急性尿道炎患者脓性分泌物的白细胞中。而淋球菌性尿道炎(gonococcal urethritis)是由NG感染的一种较常见的性传播疾病,临床主要表现以尿道炎多见,典型症状是排尿困难、尿频、尿急、尿痛等。它具有发病率高、传染性强、潜伏期短等特点[1-3]。男性在最初发病时会出现尿道发痒、微痛、尿道发红、变肿、分泌异物等症状。有些男性患者发病期尿道分泌物可能较少或没有,且病程较长,易造成漏检[4-5]。 因此建立一种男性NG病原菌快速而准确的检测方法,对诊断和控制淋病传播至关重要。恒温扩增技术(simultaneous amplification and testing,SAT)是近年来发展起来的一种新型核酸扩增技术,已在肠道病毒、肺炎支原体和结核分枝杆菌的研究中被证实较传统聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)有更高的灵敏度和特异度,且优于其他检测技术[6]。本研究应用RNA-SAT法、实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative,FQ-PCR)以及分离培养法检测322例男性疑似NG感染患者,拟建立从男性尿液样本中检测病原菌NG-RNA的方法,用于辅助男性淋球菌性尿道炎的诊断。
1 资料和方法
1.1 一般资料 选取2017年6月至2018年6月温州市人民医院男科门诊疑似淋球菌性尿道炎患者322例,年龄19~65(37.5±11.2)岁。纳入标准:①符合临床对淋球菌性尿道炎感染的诊断标准[7];②初次筛查均为首诊,且排除1周内已使用相关药物治疗的患者。本研究经本院伦理委员会批准,所有患者均知情同意。
1.2 试剂与仪器 RNA-SAT法试剂盒购自上海仁度生物科技有限公司(批号:20180201);FQ-PCR法试剂盒购自广州中山达安生物有限公司(批号:2018003);NG琼脂平板购自郑州安图生物工程股份有限公司(批号:20171011A) ......
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