徐毅，闫美玲，马继飞，赵芳菲，孙艳红，王丽华，高基民

    (1.温州医科大学 检验医学院 生命科学学院，浙江 温州 325035；2.中国科学院上海应用物理研究所微观界面物理与探测重点实验室 物理生物学研究室，上海 201800)

    光学成像探针的发展为疾病的早期诊断和治疗提供了有效的手段，相比可见光成像探针，近红外(near infrared，NIR)荧光探针具有更高的组织穿透深度和更低的组织散射[1]，在活体动物成像中具有独特的优势。NIR荧光发射的波长可分为NIR一区(NIR-I，750～900 nm)、NIR二区(NIR-II，900～1 400 nm)，NIR二区波长更长，可显著降低光在穿透生物组织中的散射现象，加上其光子自身组织吸收少，引起自发荧光效应低等特点，在体内成像中可以穿透深部组织，具有更高的空间分辨率[2]。ANTARIS等[3]用NIR二区荧光探针CH1055和一区的ICG对比发现，NIR二区荧光探针在活体成像中，可达到微米级的空间分辨率，约4 mm的组织穿透深度，较NIR一区的0.2 mm的穿透深度、毫米级的空间分辨有非常显著的提升。YI等[4]用NIR二区的荧光探针CH1055-WL对小鼠体内的关节缺损部位成像，可动态监测由关节炎病变成关节缺损的过程。硫化银量子点(Ag2S QDs)是近年来新发现的NIR二区量子点，DU等[5]于2010年首次报道了Ag2S QDs的荧光性质，它不仅具有较高的量子效率和荧光强度，而且具有非常好的生物相容性[6-7]。LI等[8]用NIR二区量子点Ag2S实时监测裸鼠体内肿瘤部位血管生及淋巴引流的过程。基于Ag2S QDs作为成像探针的优势，我们前期已经用脑靶向肽ANG修饰Ag2S QDs得到NIR二区的荧光探针[9]，该探针具有一定靶向实体瘤的能力，本研究我们进一步比较分析其体外跨血脑屏障情况，为后续的脑部原位瘤成像奠定基础。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 主要试剂：Angiopep-2多肽，其序列为TFFY GGSRGKRNNFKTEEY，相对分子质量为2 301.5，等电点10.0，购于上海强耀生物科技有限公司；Ag2S、Ag2S-PEG量子点购于苏州纳米所；普通碳支持膜购于北京中镜科仪技术有限公司；交联剂EDC/NHS、琼脂糖、多聚甲醛、十二烷基磺酸钠(SDS)购于上海国药集团化学试剂有限公司；3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑嗅盐(MTT)购于西格玛奥德里齐(上海)贸易有限公司公司；Transwell培养板购于上海百赛生物科技有限公司；MEM、DMEM培养、Gibco胎牛血清购于美国Life Tech公司；青链霉素购于上海碧云天生物技术有限公司；细胞培养皿、培养板购于西格玛奥德里齐(上海)贸易有限公司 ......