叶璐霞，徐莉菲，薛榆洁，童鹤艳，何逸昉，李校堃

    (温州医科大学 药学院，浙江 温州 325035)

    创伤性脑损伤是指暴力造成的脑实质损伤，并引起感觉、运动功能障碍[1]，甚至脑死亡等严重后果，具有较高病死率及致残率。创伤性脑损伤后的继发性损伤是这几年的研究热点，其中氧化应激是继发性脑损伤的重要环节之一[2]。维生素B12，作为叶酸中的辅酶，在神经系统发育过程中起着重要作用[3]。研究发现维生素B12的缺乏将导致蛋氨酸和S-腺苷蛋氨酸的合成障碍[4]。临床上维生素B12广泛用于治疗周围神经损伤修复，或与其他药物联合使用治疗其他神经疾病等[5]。另外，最近有报道发现维生素B12能够清除超氧化物来促进神经轴突再生情况[6]。本研究通过PC12细胞运用H2O2模型来模拟脑创伤后的氧化应激损伤，探讨维生素B12对氧化应激损伤神经细胞的保护作用。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞处理及分组：高分化鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12)购自中科院上海细胞中心。细胞培养基为RPMI 1640添加10% FBS，以及100 U/mL青霉素和100 U/mL链霉素，培养环境为37 ℃，5% CO2。细胞长满后，进行细胞铺板，待细胞长到80%～90%后，将细胞分为对照组(Control)，损伤组(H2O2)，维生素B12保护组(H2O2+VitB12)。H2O2组采用200 μmol/L 的H2O2刺激，H2O2+VitB12组提前2 h给予维生素B12(200 μmol/L)预处理 ......