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编号:1428238
RSK2通过调控人皮肤成纤维细胞的增殖与迁移促进皮肤创面修复
http://www.100md.com 2020年7月17日 温州医科大学学报 2020年第7期
划痕,1材料和方法,2结果,3讨论
     汪佳男,朱忠欣,丛维涛

    (温州医科大学 药学院,浙江 温州 325035)

    皮肤对机体发挥着重要的屏障作用,一方面皮肤可以使机体内的组织器官免受诸如物理性、机械性损伤或病原微生物等侵害,另一方面调节机体内水、电解质等物质的动态平衡,保持内环境稳定。作为人体第一道防线,皮肤易受损伤(如烧伤、慢性疾病等),从而失去屏障效应,诱发感染,严重时可致残致死[1-3]。因此,加快皮肤的创面修复,无论是在伤口难愈的疾病还是在术后修复中均具有十分重要的临床意义[4]。

    RSK2,即p90核糖体蛋白s6激酶,在多种细胞中均有表达。RSK2能够应答多种生长因子、神经递质和环境压力等[5]。RSK2调控的下游底物包括:ATF1、ATF4(CREB2)等转录因子调控细胞转录[6];Caspase-8、IκB等信号分子抑制细胞凋亡、调节细胞活性[7];组蛋白3、组蛋白2AX等表观遗传因子调控细胞的增殖与分化[8-9]。RSK2目前在肿瘤领域中研究比较广泛,肿瘤诱导药物如佛波醇-12-十四烷酰-13-乙酸酯(TPA)可激活RSK2,进而诱发肿瘤病变[10]。LUDWIK等[11]发现,RSK2的核内聚集能够促进乳腺癌的肿瘤生成。尽管RSK2能够调控细胞的增殖与迁移,但其在皮肤创面修复中的研究却未见报道。基于上述研究背景,本研究探讨RSK2对小鼠皮肤创面修复的影响。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物:SPF级C57BL/6雄性小鼠购于浙江维通利华实验动物技术有限公司,饲养于温州医科大学实验动物中心,动物生产许可证号:SCXK(浙)2019-0001。小鼠体质量约25 g,约8周龄,标准动物饲料喂养,清洁饮水,自由取食。

    1.1.2 主要试剂与耗材:一抗RSK2、Vimentin、Fibronectin、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)购于美国CST公司;Cyclin D1、血小板-内皮细胞黏附分子 (plateletendothelial cell adhesion molecule,CD31)购于美国Abcam公司;GAPDH购于合肥Biosharp公司。组织裂解液、BCA试剂盒购于上海碧云天生物技术有限公司;CCK-8试剂盒购于日本同仁化学研究所;ECL曝光液购于美国Millipore公司。

    1.1.3 主要仪器:二氧化碳培养箱(美国Thermo公司)、-80 ℃超低温冰箱(德国Eppendorf公司)、低温高速离心机(美国Thermo公司)、高通量组织研磨仪(上海万柏公司)、细胞超声破碎仪(宁波新芝公司)、微量移液器(德国Eppendorf公司)、化学发光成像仪(美国GE公司)、激光共聚焦显微镜(德国Leica公司)、正置显微镜(日本Nikon公司)、倒置显微镜(日本Nikon公司) ......

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