郑蒙蒙，施建栋，周海霞

    (1.温州医科大学 科研实验中心 流式细胞技术平台，浙江 温州 325035；2.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 儿童血液科，浙江 温州 325027)

    免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia，ITP)是儿童常见的出血性疾 病[1]，病情严重的患儿可发生内脏甚至颅内出血而危及生命，病死率为1%～3%[1-2]。ITP的病因多样，机体免疫耐受状态的失衡是导致该病发生的重要机制，其中由血小板受体与T细胞受体的相互交叉免疫反应引发T/B细胞针对自身抗原的异常活化，而触发一系列免疫反应，并最终引发ITP的相关机制研究较多[2-3]。此外，感染、妊娠、药物和遗传因素等也与ITP发病有着密切关系[2，4]。然而，由于儿童免疫细胞的发育和应答与成人免疫系统存在一定的差异，目前有关儿童ITP发病原因尚未完全明确。IL-10是一种具有免疫抑制功能的细胞因子，巨噬细胞、树突状细胞、调节性T/B淋巴细胞(Treg/Breg)等均能表达抑炎因子。血小板除了具有经典的促凝血功能外，也能表达多种功能受体包括TLR和CD40L[5]。血小板来源的CD40L能促进T细胞效应功能、抑制树突状细胞分化、促进B细胞分化及抗体类别改变[6-8]。在血小板减少的过程，机体会增加促血小板生成素(thrombopoietin，TPO)的合成。而在ITP体内模型中，内毒素刺激介导的TLR4信号能刺激TPO的合成[9]。但TLR9激动剂(CpG)联合CD40L对ITP患儿CD3-细胞的IL-10表达及存活率的影响尚不清楚。本研究通过流式细胞多因子分析技术(CBA)检测ITP患儿血浆IL-10含量，并通过CpG联合CD40L体外刺激ITP患儿和正常对照PBMC，流式细胞胞内外染色分析CD3-、CD3+、CD3-IL10+细胞的比例及细胞存活率等，为阐明儿童ITP的发病机制及探索新的潜在治疗靶点和预后指标提供科学依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 临床样本及资料：选取经确诊的ITP患儿8例(男5例 ......