欧阳勇，刘彦，叶洋波

    (杭州市富阳区第一人民医院 血管外科，浙江 杭州 311400)

    腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm，AAA)是常见的慢性主动脉退行性疾病，具有高发病率和高病死率，严重危害中老年人生命健康。临床研究发现，主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells，VSMCs)异常增殖、巨噬细胞浸润和基质降解与AAA的发生发展密切相关[1]。但是，有关AAA发展过程中的炎症浸润和VSMCs增殖和凋亡的调控机制尚未完全阐明。近年研究发现微小RNA(miRNA)在AAA组织中异常表达，且与其发生发展密切相关[2-3]。已有研究表明，过表达miRlet-7a可下调炎症反应[4]，过表达miR-21可抑制VSMCs增殖和诱导细胞凋亡，促进AAA的发展[5]。此外，LIU等[6]研究发现，miR-19a在AAA组织中高表达，但其在AAA的发生发展进程中的作用机制尚不清楚。本研究通过检测miR-19a在AAA患者AAA组织和血清中的表达水平，探讨miR-19a对主动脉VSMCs生物学行为以及炎症浸润的影响和作用机制，以期为AAA临床治疗提供潜在靶点和实验依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 收集临床样本：组织标本为2015年3月至2017年6月于杭州市富阳区第一人民医院经手术切除的15例AAA患者的腹主动脉组织和器官移植中心行肝脏、肾脏器官移植术(供体排除AAA以及其他腹主动脉相关病变)15例患者残留的部分正常腹主动脉组织。血清样本来源于15例AAA患者和同期进行体检的15例健康者。手术前均告知患者并签署知情同意书，并获得本院伦理委员会批准。

    1.1.2 细胞和主要试剂：人主动脉VSMCs(BNCC340185)和人单核巨噬细胞THP-1(BNCC100407)均购自广州北纳生物科技有限公司；细胞培养基RPMI-1640购自美国Thermo Fisher公司；细胞培养基DMEM/F12和α-MEM、胰蛋白酶和胎牛血清均购于美国Gibco公司；miR-19a inhibitor/mimic，pcDNA3.1-CDKN2B质粒以及阴性对照均由上海吉马公司合成；TRIzol试剂盒购自美国Invitrogen公司；LipofectamineTM3000和反转录试剂盒购自日本TaKaRa公司；Transwell小室购自美国康宁公司；ELISA试剂盒购于美国Sigma Aldrich公司；兔抗人细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B(cyclin dependent kinase inhibitor 2B ......