吴钊航，董伟杰，薛鹏鹏，左佳怡，王丽芬，袁健东，徐荷林

    (1.温州医科大学 药学院，浙江 温州 325035；2.温州医科大学附属第一医院 骨外科，浙江 温州 325015)

    脑胶质瘤是神经系统中常见的疾病之一，易于转移并且难以治疗，表现出较高的复发率和病死率，对神经系统的功能具有很大的危害[1]。脑胶质瘤的治疗至今沿用传统的外科手术+药物治疗+经颅放疗综合治疗模式。但由于脑胶质瘤具有侵袭和转移的特点，手术时肿瘤边界难以精确定位导致手术切除不彻底，致使微小病灶残留[2]。术后微小病灶的残留是导致肿瘤复发、预后不良的重要原因。因此准确识别原发性神经胶质瘤边界和转移性肿瘤细胞不仅是完全切除的主要因素，还是预防神经胶质瘤复发的关键因素[3]。

    术中MRI成像、近红外荧光成像以及多种方式相结合的多模态成像可使原发性肿瘤病灶可视化，精准定位转移性微小肿瘤结节，引导肿瘤精准切 除[4-5]。无论是发光肿瘤模型还是手术前造影剂标记肿瘤模型，均证明成像引导的手术切除相比自然光下的标准手术在提高肿瘤切除完全率，降低肿瘤复发率以及提高患者术后存活率等方面具有明显的优势，近年来受到广泛关注。DOGLIETTO等[6]结合荧光物质5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)和高清晰度的三维立体镜，用于神经胶质瘤手术切除。尽管许多研究已经使用诸如5-ALA和荧光素钠之类的荧光物质来指导神经胶质瘤的切除，但是仍然存在一些问题如荧光稳定性差和荧光效率低等[7]。

    量子点(quantum dots，QDs)具有良好的荧光信号和稳定性，较宽的激发光谱和较窄的发射光谱，并已应用于标记特异性细胞和组织以实现多色生物成像[8-10]。但QDs由于其理化特性容易受到环境影响从而导致细胞毒性，这使得其应用受到限制[11]。研究发现将QDs与脂质体相结合，不仅改善了QDs的稳定性，使其能保持荧光，还大大降低了其生物毒性[12]，而且还可以对载体进行修饰，使其能够靶向作用在肿瘤区域，提高其成像精确度。神经胶质瘤细胞表达αvβ3整合素，可以与含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列短肽特异性结合[13]。相比之 下，RGDyk环肽对αvβ3整合素具有更强的亲和力和更高的特异性，已被众多研究用作靶向配基来修饰纳米药物载体[14-15]。本研究拟以靶向脑胶质瘤的RGDyk环肽修饰脂质体包载QDs，用于脑胶质瘤的精准成像，实现术中荧光成像引导的肿瘤精准切除。

    1 材料和方法

    1.1 材料与试剂 氢化大豆磷脂(HSPC)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-氨基(DSPE-PEG-NH2)、胆固醇购自上海艾维特公司；c(RGDyk)环肽购自上海吉尔生化多肽公司；ZnCdSe/ZnS量子点购自武汉伽源量子点公司；N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)购自上海阿拉丁公司；2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2 ......