夏能志，胡子龙，黄群，郑宏，高红昌，杨运俊，李建策

    (1.温州医科大学附属第一医院 放射影像中心，浙江 温州 325015；2.温州医科大学 药学院 代谢组学与医药核磁共振研究所，浙江 温州 325035)

    目前采用短暂性或永久性大脑中动脉闭塞 (middle cerebral artery occlusion，MCAO)法建立局灶性脑缺血模型，是开展缺血性脑血管病实验研究的重要基础[1-3]。有研究表明，短暂性MCAO(tMCAO)和永久性MCAO(pMCAO)模型在幕上大脑组织神经元损伤、炎症、氧化应激、代谢等方面存在差异，但针对幕下小脑的相关研究尚少[4-5]。研究发现，幕上局灶性脑损伤后可引起对侧小脑出现继发性的功能改变，表现为对侧小脑血流量减少和代谢减低[6-8]。本研究应用基于核磁共振氢谱(1H NMR)的代谢组学技术探讨tMCAO和pMCAO大鼠对侧小脑的代谢变化，为脑缺血的早期诊治提供准确的生物化学信息。

    1 材料和方法

    1.1 动物及分组 选取64只健康雄性SD大鼠(上海斯莱克实验动物有限责任公司)，清洁级，体质量250～320 g。适应性饲养1周后分为对照组(CON，n=12)、pMCAO组(n=29)和tMCAO组(n=23)。实验期间大鼠自由饮水、进食，室温保持(22±3)℃，相对湿度为(60±10)%，昼夜保持12 h交替变化。

    1.2 脑缺血模型制备

    1.2.1 大鼠pMCAO模型的建立：参照传统的LONGA法并加以改良[9]。①术前禁食，称体质量后10%水合氯醛(0.25 mL/100 g)进行腹腔注射麻醉，颈部备皮、消毒；②颈部正中皮肤作一长约2 cm纵行切口，剪开浅筋膜、钝性分离颈部肌肉，暴露并分离左侧颈总动脉(common carotid artery，CCA)、颈内动脉(internal carotid artery，ICA)、颈外动脉(external carotid artery，ECA)以及与CCA伴行的迷走神经，于CCA远心端和近心端及ECA处挂线备用；③显微动脉夹暂时夹闭ICA ......