周功挺，王继生，陈亦明，洪重，廖毅

    (温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 肝胆外科，浙江 温州 325027)

    以吉西他滨(gemcitabine，GEM)和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)为基础的两大类方案对治疗胆管癌延长生存时间取得了一定的效果，但对抑制肿瘤的复发及进展作用有限，且不良反应较大，目前GEM耐药已成为导致其疗效不佳的重要原因[1-2]。 缺乏有效敏感的化疗药物及合理的化疗方案是胆管癌综合治疗的瓶颈。JAK/STAT3在机体的生长发育和稳态过程中发挥重要作用，但其在肿瘤中的激活影响细胞增殖、侵袭、上皮-间充质转变和血管生成的多种信号通路，被认为是肿瘤治疗的靶点[3-5]。研究结果表明隐丹参酮是一种有效的STAT3抑制剂，可有效抑制STAT3 Tyr705磷酸化，从而抑制肿瘤细胞的生长[6-8]，可增强紫杉醇对舌鳞癌细胞毒性作用[9]，逆转人肺癌A549细胞顺铂耐药等[7]。

    然而，目前仍不清楚隐丹参酮是否能增强胆管癌吉西他滨化疗的作用。因此，本研究探讨隐丹参酮与吉西他滨联合用药对胆管癌QBC939细胞株的体外凋亡及周期的影响，并探讨STAT3在其中的作用。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 主要试剂：胎牛血清、RPMI-1640培养基、青霉素和链霉素购自美国Gibco公司；BCA蛋白浓度测定试剂盒、CCK-8试剂盒、RIPA缓冲液等免疫印迹试剂购自上海碧云天公司；吉西他滨购自美国礼来公司；隐丹参酮粉剂(批号：S228530)购于美国Selleck公司，纯度>99%，溶于DMSO中，配制成10 mmol/L 的储存液，于-20 ℃保存，使用时稀释至所需浓度。

    1.1.2 抗体：STAT3、pSAT3抗体购自美国CST公司，Bcl-2、Bax购自英国Abcam公司 ......