程振宇，申屠华松，陈亦华，何忠平，俞北伟，王瑞权，傅斌

    (1.金华市人民医院 神经外科，浙江 金华 321000；2.金华市食品药品检验检测研究所，浙江 金华 321000；3.金华市人民医院 临床医学检验科，浙江 金华 321000；4.金华市人民医院 病理科，浙江 金华 321000)

    自发性蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage，SAH)主要由脑动脉瘤破裂引起，预后较差[1]。除脑血管痉挛和迟发性脑缺血外，早期脑损伤是导致SAH不良预后的重要原因[2]。神经细胞凋亡是SAH后早期脑损伤的重要机制之一。SAH后加剧的神经细胞凋亡可造成患者运动和认知功能障碍，影响患者预后[3]。线粒体途径是SAH后神经细胞凋亡的三条重要途径之一[4]。Omi/HtrA2是一种线粒体丝氨酸蛋白酶。细胞受到刺激后，Omi/HtrA2分子被释放到细胞质，通过增强含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase，caspase)活性参与线粒体凋亡途径发挥致凋亡作用[5]。UCF-101是Omi/HtrA2特异性抑制剂，可明显减少外伤性脊髓损伤、脓毒症性脑病或脑缺血大鼠的神经细胞凋亡，显著改善神经功能[6-9]。本研究使用UCF-101腹腔注射对SAH大鼠进行治疗，旨在评价其对SAH大鼠神经细胞凋亡的抑制作用及对神经功能的改善作用，为SAH药物治疗的研究提供新思路。

    1 材料和方法

    1.1 材料 健康Wistar大鼠(上海斯莱克实验动物有限责任公司)，雄性，清洁级，体质量250～300 g； UCF-101(规格：5 mg/支，德国Calbiochem公司)；ApoAlert细胞凋亡检测试剂盒(规格：100T/盒， 美国Biosciences Clontech公司)；二辛可宁酸(bicinchoninic acid，BCA)法蛋白定量试剂盒(美国Thermo Scientific公司)；脱色摇床(型号：TY-80B，常州澳华仪器有限公司)；转印槽(型号：Trans-Blot，美国Biorad公司)；电泳仪(型号：DYCP-31C，北京六一生物科技有限公司)；小型垂直电泳槽(型号：164-8001，美国Biorad公司)；生物倒置显微镜[型号：IX-71，奥林巴斯(中国)有限公司]。

    1.2 方法

    1.2.1 分组与造模：按照随机数字表法将90只大鼠分成Sham组、SAH组和UCF-101组 ......