蓝秀，李伟文，孙蕾，黎媛，赵嘉璐

    温州医科大学附属第五医院 呼吸科，浙江 丽水 323000

    据报道，肺癌年发病例数高达182万以上，每年约有160万例肺癌患者死亡[1]，其中非小细胞肺癌占肺癌发病总数的85%，且以中晚期肺癌为主，5年存活率也小于15%[2-3]。研究发现多种药物不仅能诱发肿瘤细胞死亡，还能促进濒死细胞释放免疫原性，促使细胞发生免疫原性凋亡，即为免疫原性细胞死亡(immunogenic cell death，ICD)。探索有效刺激的方法和途径已是肿瘤免疫治疗的热点话题[4-6]。IGFBP-4是细胞内最小的胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like grouth factor binding protein，IGFBPs)，可分泌至细胞外，发挥生物学功能，研究表明肺癌组织中IGFBP-4低表达促使细胞增殖、迁移，IGFBP-4缺乏是肺癌不良预后的重要原因[7-8]，然而，IGFBP-4对ICD的影响及机制仍未明确。本研究重点关注外源性IGFBP-4对ICD的影响，并初步探讨其可能机制。

    1 材料和方法

    1.1 材料 重组人IGFBP-4 蛋白(批号：804-GB-025，纯度≥97%)，购自美国R&D Systems公司，N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC，批号：ST1546)、ROS检测试剂盒(批号：S0033)、总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性检测试剂盒(WST-8法，批号：S0101)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)检测试剂盒(批号：S0131)购自上海碧云天生物技术有限公司。p38 siRNA质粒(sc-29433)、磷酸化(p)-p38抗体(sc-166182)、p38抗体(sc-81621)、Actin抗体(sc-8432)购自圣克鲁斯生物技术(上海)有限公司 ......