吴贤敏，张杰，杨子飞，叶凡，张悦，陈晓云

    温州医科大学附属第一医院 耳鼻咽喉头颈外科，浙江 温州 325015

    鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)是一种起源于鼻咽部鳞状上皮细胞的恶性肿瘤，具有较高的发病率和病死率，因其解剖位置隐蔽和症状非特异性等特点，70%～80%的NPC患者往往出现局部晚期症状时才得以确诊[1]。目前，NPC的主要治疗手段主要包括早期放疗和晚期放化疗。然而，放疗会引起许多并发症，例如前庭功能障碍，放射诱发的视振荡，感觉神经性听力下降，渗出性中耳炎(otitis media exudative，OME)和颞骨放射性骨坏死(osteoradionecrosis，ORN)，甚至是危及生命的大出血[1-2]。一些化疗药物(如顺铂)对NPC患者的疗效已经得到证实，但其耳毒性等不良反应限制了它们在临床上的应用[3]。因此，寻找新型低毒高效的药物对于治疗NPC具有重要意义。

    α-茄碱是一种三糖糖苷生物碱，主要存在于马铃薯块茎和茄属植物中[4-6]。近年来，关于α-茄碱对各种人类癌细胞株的体内、外抗增殖活性的研究均有报道[7-11]，然而，其潜在的细胞和分子机制尚未被完全阐明。本研究探究了α-茄碱在体外对NPC CNE-2细胞的抑制作用，旨在阐明α-茄碱对肿瘤细胞生物学行为的影响及其具体细胞分子机制，以期为NPC的治疗提供新思路，为新型抗肿瘤药物的研发提供实验基础和理论依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料 人鼻咽癌细胞系CNE-2购自中国科学院上海生命科学研究所细胞库。α-茄碱和青霉素G购自美国Sigma公司；CCK-8试剂盒、RIPA裂解缓冲液及TRIzol试剂均购自北京Protein Biotechnology 公司；Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒购自美国BD Biosciences公司；Mito-SOX试剂盒购自美国Life Technologies公司；SDS-PAGE凝胶配制试剂盒购自美国Bio-Rad公司；ECL显色液购自美国 Abcam公司；一抗、二抗均购自美国Sigma公司；cDNA合成试剂盒购自美国Thermo Fisher Scientific 公司；FastStart Universal SYBR Green Master (Rox)试剂盒购自美国Roche Life Science公司；戊二醛、锇酸及乙酸铀酰均购自美国Sigma-Aldrich公司；丙酮购自上海国药集团化学试剂有限公司；环氧树脂购自英国TAAB公司；枸橼酸铅购自美国Polysciences公司 ......