李斌武，叶振悦，杨思嘉

    1.宁波市奉化区中医医院 呼吸科，浙江 宁波 315500；2.中国科学院大学宁波华美医院 呼吸科， 浙江 宁波 315010

    非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer， NSCLC)是最常见的肺癌类型，占肺癌的80%～85%[1-2]。化疗是肺癌主要的治疗方式，但化疗药物存在不良反应大、易复发、易产生耐药性等多方面的局限[3-4]。尽管以表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂为代表的各类靶点抑制剂在治疗晚期及复发性肺癌上效果优于传统的铂类化疗方案，但依旧存在耐药性、适应证窄等问题[5-7]。因此，寻找新的靶蛋白并阐明其在肺癌发生、发展中的分子机制，可以为肺癌早期诊断和优化治疗方案上提供思路。

    高迁移族蛋白A(high-mobility group A，HMGA)蛋白家族是一类结构性转录因子，其通过改变染色体结构调节与DNA复制、转录、重组和修复等相关基因的表达[8-10]。HMGA蛋白分为HMGA1和HMGA2两种亚型，其中HMGA2蛋白的过度表达被证明与NSCLC的发生、发展及侵袭转移密切相关[11-13]。因此，研究HMGA蛋白如何调节NSCLC增殖和侵袭转移可以为NSCLC的治疗提供新的思路。基于此，我们通过沉默HMGA1和HMGA2基因在A549细胞内的表达，初步探究了HMGA1和HMGA2在NSCLC细胞增殖和侵袭转移过程中的作用及分子机制。

    1 材料和方法

    1.1 材料 人NSCLC细胞株A549购自中国科学院上海生命科学研究院细胞库。RPMI1640完全培养基、胰酶、Annexin V-FITC和碘化丙啶(propidium iodide，PI)凋亡检测试剂盒、MTT及BCA蛋白浓度测定试剂盒均购自南京凯基生物技术股份有限公司。siRNA-NC、siRNA-HMGA1、siRNA-HMGA2、Opti-MEM及lipofectamine2000 均购自上海爱丁堡生物技术有限公司。转录因子叉头框M1(Forkhead box M1，FOXM1)、c-Myc、E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、β-actin一抗及鼠二抗、兔二抗均购自美国Cell Signaling Technology公司。实时定量PCR(realtime quantitative PCR，Q-PCR)试剂盒/SYBR Green Realtime PCR Master Mix、RIPA细胞裂解液及血清均购自上海碧云天生物技术公司。RNAiso Plus RNA提取试剂盒及FOXM1、c-Myc、ECadherin、N-Cadherin、Vimentin、β-actin引物均购于大连宝生物科技技术有限公司 ......