沈丽君，李铎，方周溪，陈朝生

    1.温州医科大学 检验医学院 生命科学学院，浙江 温州 325035；2.温州医科大学附属第一医院 肾内科，浙江 温州 325015

    电镜检查在肾脏病的诊断中起着十分重要，有20%～30%的肾脏病患者需要依赖电镜得以确诊[1-3]。 然而由于标本量不足或者取材不满意等原因，在常规电镜标本(组织经戊二醛和锇酸双重固定后，经脱水、树脂包埋等步骤制作的标本)不可用的情况下，需要用4%中性甲醛固定、石蜡包埋的组织转制电镜标本用于诊断。石蜡包埋标本转制电镜样品的方法有多种[4-6]，需要在日常工作中根据所在实验室的实际情况(如标本类型、包埋剂种类、脱水剂种类等)选择合适的实验方案。目前各电镜室常用的方法是将石蜡标本脱蜡后再水化，后经戊二醛和锇酸双固定后，再脱水包埋成块。在结合多年的临床实验经验和文献报道[7]的基础上，我们改进了一种以EPON 812为包埋介质的适合肾穿刺活检标本石蜡块转制电镜样品的快速方法(以下简称快速脱蜡固定法)，经与传统水化后再转制电镜样品的方法(以下简称水化法)对比研究，发现快速脱蜡固定法能够得到比水化法更高质量的电镜图像，同时有效缩短样品制备时间，现报告如下。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 组织标本：选取2018年5月至2019年9月温州医科大学附属第一医院肾内科确诊的石蜡包埋块标本共20例，其中IgA肾病6例、冷球蛋白血症肾小球肾炎1例、狼疮性肾炎5例、糖尿病肾病5例和肾淀粉样变性病3例，所有患者均经肾脏穿刺病理诊断确诊。本研究经温州医科大学附属第一医院伦理委员会审批通过。

    1.1.2 试剂配置：①含1%四氧化锇的二甲苯溶液配置：1 g四氧化锇(OSO4，TED PELLA，18456)溶于100 mL二甲苯溶液中；②包埋剂配置：选取PELCO?Eponate12试剂盒(TED PELLA，18010)，参考Luft法的配方比例[8]，分别量取Resin 25.7 mL、DDSA 9.3 mL、MNA 16.5 mL，充分混匀后，加入0.8 mL DMP-30并再次混匀；③2%醋酸铀水溶液配置：1 g醋酸铀粉末溶于50 mL双蒸水；④1%枸橼酸铅水溶液配置：0.1 g枸橼酸铅粉末(TED PELLA ......