黄丽丽，陈婵婵，汪佳兵，张佳枫，吴建章

    1.宁波市医疗中心李惠利医院 药剂科，浙江 宁波 315040；2.温州医科大学 药学院 化学生物学研究中心，浙江 温州 325035；3.台州市立医院 台州学院附属市立医院 药剂科，浙江 台州 318000

    氧化应激与心血管疾病、脑缺血、癌症和衰老等多种病理过程密切相关，过量产生的自由基在这些病理生理过程中起着至关重要的作用[1-4]。自由基的持续产生和脂质过氧化促使细胞形成了强大而复杂的抗氧化防御系统，可清除已存在的活性氧所引发的连锁反应。同时，体外抗氧化剂的补充也极为重要[5]。查尔酮类似物属于黄酮类化合物[6]，广泛存在于水果蔬菜和天然药物中，具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种生物学活性[7]。近年来的研究表明合成的查尔酮类似物一般也具有天然查尔酮高效低毒的优点。但目前有关抗氧化活性查尔酮类化合物的报道主要是天然查尔酮，鲜少有抗氧化活性的合成查尔酮类似物的研究报道。

    研究表明具有多羟基的抗氧化剂具有较好的生物活性[8]。本研究通过羟醛缩合反应，合成一系列含羟基或不含羟基的查尔酮类似物，检测其对H2O2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用，为得到高效低毒的抗氧化候选药物奠定基础。

    1 材料和方法

    1.1 材料 H2O2(上海国药化工公司)，DMSO(广州四佳生物科技公司)，DPPH和槲皮素(上海国药集团化学试剂有限公司)，大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化(PC12)细胞(中国科学院生物化学与细胞生物学研究所)，DMEM高糖培养基(美国Gibco公司)，胎牛血清(FBS，美国HyClone公司)，Bcl-2抗体(3498，1:300)、Bax抗体(5023S，1:1 000)、cleavedcaspase-3抗体(9664，1:1 000) 和山羊抗兔IgG二抗(7074，1:3 000)均购自美国CST公司；GAPDH抗体(sc-47724，1:1 000，美国Santa Cruz公司)；MDA酶联免疫试剂盒和Hoechst染色试剂盒(上海碧云天生物技术研究所)，MTT和其他化学品(美国Sigma公司)。所用试剂均为分析纯。薄层和柱层析用硅胶均为青岛海洋化工厂产品。

    1.2 方法

    1.2.1 查尔酮类似物的合成：以不同取代苯乙酮和芳醛为原料，通过羟醛缩合反应合成了16个查尔酮类似物。在极性溶剂中，以HCl为催化剂，室温下合成了含羟基的查尔酮；在5～8 ℃的NaOH条件下合成了不含羟基的查尔酮。反应结束时，得到沉淀物或向混合物中加水沉淀产物。纯化后化合物产率为20%～95% ......