陈哲，王勤宁，黄璐捷，史信宝，胡静

    宁波市医疗中心李惠利医院，浙江 宁波 315040，1.心胸外科；2.放疗科

    肺癌具有较高的发病率及病死率，多数患者在确诊时已处于中晚期，治疗效果及预后不理想[1]。随着分子生物学的发展，靶向治疗成为肺癌治疗的新方法，寻找有效的肺癌治疗靶点具有重要意义。大 量研究表明，长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)及微小RNA(microRNA，miRNA)与肺癌发生发展及预后密切相关，可作为肺癌诊疗的特异性靶点[2]。肌联蛋白反义RNA1(titin antisense RNA1，TTN-AS1)是新近发现的lncRNA，发挥促癌作用，有研究显示，在甲状腺癌、食管癌、骨肉瘤等多种肿瘤中lncRNA TTN-AS1异常表达，其表达可促进肿瘤进展[3-5]。有研究显示，肺癌中TTN-AS1高表达，抑制其表达可降低癌细胞增殖、侵袭和迁移能力[6]。有研究报道，过表达miR-1271可在体内体外抑制肺癌生长[7]；lncRNA TTN-AS1可通过靶向抑制miR-1271促进前列腺癌细胞的增殖和侵袭[8]。TTNAS1和miR-1271都可影响肺癌进展，且lncRNA TTNAS1和miR-1271存在靶向关系，但TTN-AS1是否可通过调节miR-1271影响肺癌细胞增殖、侵袭和凋亡尚未可知。本研究以肺癌A549细胞为研究对象，旨在探讨TTN-AS1调节miR-1271对肺癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及可能的分子机制，为肺癌分子水平的治疗提供一定的参考及依据。

    1 材料和方法

    1.1 试剂和仪器 DMEM培养基、Opti-MEM培养基、胰蛋白酶、青霉素-链霉素、胎牛血清均购自美国Gibco公司；Lipofectamine 2000、TRIzol试剂盒均购自美国Invitrogen公司；荧光定量PCR试剂盒及反转录试剂盒均购自日本TaKaRa公司；CCK-8试剂盒购日本Djingo公司；Transwell小室购自美国Corning公司；细胞凋亡试剂盒、BCA蛋白浓度检测试剂盒、RIPA裂解液均购自上海碧云天生物技术有限公司；PI3K、p-AKT、PCNA、E-cadherin、cleaved caspase 3和3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1 (3-phosphate dependent protein kinase 1，PDK1)抗体购自美国Abcam公司；双荧光素酶报告基因检测试剂盒购自美国Promega公司；RT-PCR仪购自瑞士Roche公司；倒置显微镜购自日本Olympus公司；FACScan流式细胞仪购自德国BD Biosicences公司；酶标仪购自美国Bio-Rad公司 ......