江昊薇，易晴晴，沈丹杰，高红昌，赵良才

    温州医科大学 药学院，浙江 温州 325035

    乳酸作为一种能量分子，在学习记忆形成的过程中发挥着重要作用[1]。但是，因病理因素导致的乳酸蓄积，即乳酸不能被神经元氧化利用可能是学习记忆下降的重要因素[2-3]。成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21, FGF21)通过其受体参与糖脂代谢，并能够穿过血脑屏障直接在中枢系统发挥作用[4-6]。有研究报道，FGF21具有增加乳酸进入神经元的作用，因而改善了阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)小鼠认知功能障碍[7]。本研究拟采用乳酸蓄积诱导的学习记忆下降的小鼠模型，给予FGF21进行干预治疗，应用基于核磁共振的代谢组学技术筛选海马中的特征代谢物。

    1 材料和方法

    1.1 动物与试剂 6周龄雄性C57BL/6小鼠(体质量18～22 g)购自上海斯莱克实验动物有限公司。所有动物均饲养于温州医科大学实验动物中心SPF级动物房，整个实验过程给小鼠喂食标准鼠粮和水，动物许可证号：SYXK(浙)2021-0020。乳酸钠购自美国Sigma公司(批号：BCCB9288)。FGF21购自浙江省生物制药工程重点实验室(批号：STD20190601)。

    1.2 方法

    1.2.1 动物造模：小鼠适应性饲养1周以后分成3组，分别为对照组、乳酸组及乳酸+FGF21组(每组各8只)。乳酸组和乳酸+FGF21组小鼠每日腹腔注射乳酸(1.5 g/kg)共持续8周，乳酸+FGF21组小鼠在乳酸给药第4周时每天腹腔注射FGF21药物(1.5 mg/kg)[8]，对照组腹腔注射同等体积的0.9%氯化钠溶液。8周后所有动物进行水迷宫和Y迷宫实验。

    1.2.2 Y迷宫实验：Y迷宫是由木板拼接成的Y字形，三条臂从中心延伸，臂与臂间呈120°夹角。将三条臂分别用A、B、C标记。实验时将小鼠放入迷宫一条臂的末端，允许在迷宫中不受外界干扰自由移动探索5 min，记录小鼠的运动轨迹包括进入各臂的顺序及总次数。当小鼠连续3次进入不同的臂时，记作1次正确交替反应，统计正确交替反应次数，计算自发交替率[9-10]。

    1.2.3 水迷宫实验：Morris水迷宫用于评估小鼠的空间学习和记忆能力。采用文献[7]的方法，水迷宫测试在圆形水池中进行(池径110 cm，池高30 cm)，水池内注满无毒性白色涂料，其温度为(26±1)℃。包含圆形逃生平台(平台直径为7 cm)浸没在水面下方1 cm ......