叶挺宇，黄航，潘悦，蔡冰

    温州医科大学附属第一医院 泌尿外科，浙江 温州 325015

    膀胱尿路上皮癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一，具有多中心性、易复发性、恶性程度高的特点，明确膀胱癌的发生机制对于膀胱癌诊疗具有重要意义。长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)是一类核苷酸长度超过200 nt，但不参与编码蛋白的RNA。近年研究显示，LncRNA的异常表达在多种肿瘤的进程中发挥着关键作用[1]。本课题组前期研究发现，linc00346与膀胱癌的发生发展密切相关[2]，但其具体分子机制尚不明确。PTEN是一种肿瘤抑制基因，定位于染色体10q23.3，具有双重特异性磷酸酶活性，在对PI3K/Akt信号通路的调控中发挥着关键作用，能够影响细胞的迁移、增殖及凋亡等重要过程[3]。本研究探讨linc00346通过靶向PTEN调控PI3K/Akt通路对膀胱癌细胞增殖的影响。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 组织标本：膀胱癌组织标本来源于温州医科大学附属第一医院泌尿外科根治性膀胱全切术后经病理确诊为膀胱尿路上皮癌的手术存档标本，共30例。配对的癌旁正常组织来源于同一患者的手术标本，距离膀胱癌瘤体3 cm以上，并经病理确诊为正常组织。本研究经温州医科大学附属第一医院伦理委员会审批同意。

    1.1.2 膀胱癌细胞系：人膀胱癌细胞系T24购自美国ATCC细胞库(北京中原公司代理)。

    1.1.3 主要试剂：RPMI-1640培养、胎牛血清(美国Gibco公司)，LipofectamineTM2000(美国Invitrogen公司)，GV248慢病毒载体系统(上海吉凯基因公司)，SF1670(美国InvivoChem)，Prime ScriptTMRT Master Mix(日本Takara公司)，兔抗PTEN、p-Akt、Akt单克隆抗体(美国Santa Cruz公司) ......