鲍小栋，方杰，金俊华，郑桂茹

    1.金华市人民医院 药学部，浙江 金华 321000；2.杭州医学院 实验动物中心，浙江 杭州 310063

    以肝细胞癌为主的原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，在所有肿瘤疾病患者中约占5.6%[1-4]。在世界范围内，肝癌的发病率位居第5位，其病死率更是位列第3位；每年全球新增肝癌患者约为62.6万人，其中发展中国家的肝癌发病率要高于发达国家[4-5]。临床研究发现肝癌发生时肝脏已经受到严重损伤，且肝癌细胞具有高转移能力和高复发率的特点，使得肝癌的治疗一直是临床上面临的重要难题。中医药是我国的传统医学，在肝癌的预防和治疗方面发挥着重要的作用。蛇床子素为香豆素类代表化合物，化学名为7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素，来源于传统中药蛇床子[6-9]。现代药理学研究发现，蛇床子素对心脑血管系统、中枢神经系统、内分泌系统、免疫系统等方面的疾病均具有治疗效果[10]。近年来，随着对蛇床子素研究的深入，多项体外研究实验表明，蛇床子素对肿瘤细胞显示出一定的抗增殖作用[11-14]。蛇床子素作为一种低毒、具有抗肿瘤效应的天然产物提取物和先导化合物，其广泛的抗肿瘤作用虽然已被证实，但其抗肝癌细胞的增殖和侵袭的作用效果及抗肝癌相关机制仍不清楚，尚需进一步研究。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞：人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721和Bel-7402均购于中国科学院细胞库，于液氮中保存，使用前复苏。细胞培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，置于37 ℃、5% CO2及饱和湿度的条件，待细胞贴壁生长2～3 d后采用胰蛋白酶消化传代，待细胞稳定传代2～3代后开始实验。

    1.1.2 主要试剂：蛇床子素(纯度>99%，CAS号：484-12-8)和二甲基亚砜(DMSO，纯度>99.9%，CAS号：67-68-5)购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司，蛇床子素完全溶于DMSO中配制成终浓度为 10 mmol/L备用。5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)(CAS号：77180-80-4 ......