王焓，段萍

    1.哈尔滨医科大学附属第二医院 妇科，黑龙江 哈尔滨 150000；2.温州医科大学附属第二医院 妇科，浙江 温州 325000

    子宫内膜异位症(endometriosis，EMs)是病因未明且难以根治的慢性炎症性疾病[1]，大约有10%的育龄期女性受其影响[2]，对妇女的生活质量产生重大影响，表现为痛经、不孕和慢性盆腔疼痛等[3]。目前主流学说仍为Sampson学说，但月经逆行的发生率和EMs的发病率存在显著不符[4]，表明存在其他病因影响EMs的发病。因此，探索EMs的发病机制备受关注。

    纤维化是指纤维结缔组织在炎症发生或受损组织内及其周围过度积聚[5]，是大多数慢性炎症性疾病的一个病理特征，可以影响任何器官，轻则导致器官形成永久性瘢痕，重则导致器官功能失调和衰竭[6]。有研究发现m6A修饰水平的改变可影响细胞纤维化的能力[7-8]，但目前m6A修饰对EMs纤维化的影响还未见报道。本研究旨在探讨m6A去甲基化酶脂肪质量和肥胖相关(fat and obesityassociated，FTO)基因对异位子宫内膜间质细胞(ectopic endometrial stromal cells, eESCs)纤维化的影响及其可能机制。

    1 材料和方法

    1.1 生物信息学分析 利用m6A2 Target数据库(http://m6a2target.canceromics.org/)预测可能与FTO具有靶向关系的含m6A结合位点的蛋白质。

    1.2 原代细胞培养 收集子宫肌瘤患者的在位内膜组织与卵巢子宫内膜异位瘤或深度浸润性EMs患者的异位病变，并切成1 mm3的碎片，随后与4%的IV型胶原酶(C5138，Sigma，美国)混匀，于37 ℃的恒温水浴中消化45～60 min。消化后的组织经充分过滤后获得细胞悬液。于1 200×g，5 min离心细胞悬液，弃去上清液 ......