李影，戴胜杰，孙学成，孔鸿儒，陈咨苗，孙洪伟

    温州医科大学附属第一医院，浙江 温州 325015，1.手术室；2.肝胆胰外科；3.内分泌科

    急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)是临床上常见的急腹症，急性肺损伤是其最常见的并发症和死因[1]。发病时，胰腺自身消化酶激活对胰腺自身产生消化作用，胰腺局部的炎症损伤导致热休克蛋白(heat shock proteins, HSPs)从受损细胞向胞外释放，而后通过血液循环到达全身各处，激活其他细胞表面模式识别受体，促进炎症反应进程[2]， 从而破坏血管内皮细胞，引起多脏器炎症连锁反应及功能衰竭(其中肺脏器官最易受损)[3-4]。因此，本研究探讨在AP炎症反应进程中，HSP70是否通过攻击肺血管内皮细胞，造成内皮细胞损伤，从而进一步加重炎症反应。期望寻找有效的炎症反应靶点来遏制AP炎症连锁反应。

    1 材料和方法

    1.1 主要试剂与抗体 小鼠HSP70 ELISA试剂盒(江苏雨桐生物科技有限公司)，TNF-α、IL-6 ELISA试剂盒(美国Proteintech公司)，雨蛙素、LPS(北京索莱宝科技有限公司)，HSP70抗体(美国Proteintech公司)。

    1.2 AP小鼠造模方法及分组 本研究采用雌性NIH小鼠(体质量约25 g)，AP造模前禁食18 h，随后连续腹腔注射雨蛙素(50 μg/kg)6次，每次间隔1 h，末次腹腔注射雨蛙素后随即注射脂多糖(10 mg/kg)； 对照组小鼠腹腔注射等体积0.9%氯化钠溶液。成功构建对照组小鼠和AP小鼠模型组后，相应对照组(n=6)、AP组(n=6)、HSP70+AP组(n=6)分别通过尾静脉注射3次0.9%氯化钠溶液、0.9%氯化钠溶液和HSP70抗体，从而最终构建本研究采用的3个实验组。

    1.3 胰腺组织含水量测定方法 处死小鼠后仔细解剖小鼠胰腺，剔除非胰腺组织，随后分别测量解剖后胰腺组织质量和经60 ℃烘箱烘烤24 h后胰腺组织质量，计算公式：胰腺组织含水量=(胰腺组织湿质量-胰腺组织干质量)/胰腺组织湿质量× 100% ......