阮宇菲，刘琦，吴博，许智勇，陈珂，蒋敏之，张俊玲，余金生，陈益平

    1.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 儿童感染科，浙江 温州 325027；2.安徽医科大学 基础医学院，安徽 合肥 230000

    巨细胞病毒(cytomegalovirus, CMV)是一种在自然界中广泛存在的人致病的疱疹病毒，是疱疹病毒亚科家族中的一员。在我国一般人群CMV抗体阳性率为86%～96%，育龄期女性达90%以上[1]，婴幼儿期为60%～80%，CMV初次感染一般发生于儿童时期甚至胎儿期，肝脏是其主要的靶器官之一[2]。临床上患CMV感染的婴幼儿，绝大多数都有肝脏受累的表现，从亚临床感染到出现血清转氨酶的升高，肝脾肿大、黄疸及胆汁淤积等严重表现[3-4]，此外CMV感染是实体器官移植或骨髓移植后最常见的机会性感染之一，且治疗难度大[5-8]。目前CMV的致病机制仍不明确。研究表明，鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus, MCMV)感染的小鼠模型能够模拟除先天性CMV感染以外的多种临床疾病[9]，如眼部疾病[10-11]、呼吸系统疾病[12-13]及肿瘤[14]等。但对于肝炎的研究较少见，因此，本研究通过建立MCMV感染小鼠急性肝炎模型，为进一步深入研究HCMV感染所致的肝炎的致病机制、疫苗研制以及探索新型更有效的生物学治疗手段提供科学的理论依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物及实验室要求：无特定病原体(specific pathogen free, SPF)级C57BL/6小鼠， 4～6周龄，雄性，体质量16～20 g，购自安徽医科大学实验动物中心[许可证号：SCXK(皖)2017-001]，本研究获安徽医科大学实验动物伦理委员会的批准，并按照美国国立卫生研究院《实验动物护理和使用指南》进行。CMV属于生物安全等级2级(biosafety level-2, BSL-2)[15]，本研究在安徽医科大学具有P2等级标准的实验室开展。

    1.1.2 病毒和细胞株：MCMV Smiths株由安徽医科大学临床病毒学研究所赠予，在原代小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast, MEF)上进行传代增殖培养。根据BRIZI等[16]的研究，取孕14 d的BALB/c小鼠胚胎自行制备原代MEF细胞，按常规条件培养，实验用细胞为2～5代培养物。实验结束后所有耗材经煮沸、高压灭菌后按医疗垃圾处理。

    1.1.3 抗体及引物序列：Mouse Anti M112-113/E1 (MCMV)mAb ......