傅扬扬，黄晓颖，王良兴

    温州医科大学附属第一医院 呼吸与危重症医学科，浙江 温州 325015

    肺癌是一种最常见的恶性肿瘤，其病死率在肿瘤中位居第一[1]。近年来，分子靶向治疗和免疫治疗明显改善了肿瘤患者的预后，但肺癌的5年生存率仍然只有22%[2]。因此，发现新的肿瘤相关基因和治疗靶点对肺癌的诊断和治疗具有重要的意义。A激酶锚定蛋白9(A kinase anchoring protein 9, AKAP9)是一种参与微管成核的高尔基体/中心体支架蛋白[3-4]。研究发现，AKAP9参与了结直肠 癌[5]、甲状腺癌[6]、乳腺癌[7]、急性髓系白血病[8]的发生或转移。在一项大规模的肺癌相关全基因组筛查中，AKAP9被发现是潜在的易感基因[9]。在前期的研究中，我们通过Kaplan-Meier plotter平台分析AKAP9的表达水平与肺癌预后的关系，结果发现AKAP9表达高的患者生存时间明显缩短。然而，AKAP9在肺腺癌细胞中的确切作用尚未明了，因此本研究通过体外实验探讨AKAP9对肺腺癌细胞A549增殖和迁移的作用，并进一步阐明其可能的分子机制。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞：肺腺癌细胞A549购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库/中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。

    1.1.2 主要试剂：shRNA购自上海吉凯基因医学科技股份有限公司；MTT试剂购自美国Sigma-Aldrich公司；SYBR Green购自天根生化科技(北京)有限公司；MLV-reverse transcriptase试剂盒购自美国Thermo Fisher Scientific公司；细胞周期试剂盒购自美国BD Pharmingen公司；AKAP9抗体购自美国Santa Cruz公司；P27、细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期素依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4, CDK4)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)、磷酸化EGFR(p- EGFR)、细胞外信号调节激酶(extracellular signal- regulated kinase, ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、β-actin抗体购自美国Cell Signaling Technology公司 ......