王婷，蔡雪黎，李海燕，黄周青，王永华

    1.温州医科大学附属第一医院心内科，浙江 温州 325015；2.温州医科大学附属第一医院康复科，浙江 温州 325015；3.温州医科大学体育部，浙江 温州 325035

    糖尿病导致的糖尿病心肌病(diabeticcardiomyopathy, DCM)是独立于高血压、冠心病的特异性心肌病，主要病理表现为心肌肥大、间质和血管外周纤维化及心肌细胞坏死，最终发展为充血性心力衰竭[1]。研究发现，运动疗法在一定程度上通过不同机制(如抗炎、减少凋亡或调控自噬水平)缓解慢性疾病如高血压、DCM以及某些肿瘤的进展[2-4]。有文献报道，运动干预可以降低心血管疾病的病死率[5]。美国糖尿病学会也倡导运动作为一种重要的非药物干预方式，用于改善糖尿病心脏病并发症。WNK激酶2(withnolysinekinases2, WNK2)是一种胞质丝氨酸-苏氨酸激酶[6]，主要表达于脑、心肌、小肠和结肠[7-8]，参与调控细胞增殖、肿瘤生长和侵袭[9]；WNK2表达的缺失也与延缓衰老有关[10]。本研究通过对db/db糖尿病小鼠进行10周的跑台运动干预，探讨WNK2在运动保护DCM中的作用。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物和细胞

    1.1.1 实验动物：20只8周龄雄性db/db小鼠，20只C57BL/6小鼠购自南京模式动物研究所，于温州医科大学实验动物中心SPF级实验动物房分笼饲养。实验期间自由进食和饮水，所有小鼠统一饲养在12h:12h光-暗交替循环的恒定室温环境中。本研究采取的实验方案已由温州医科大学实验动物伦理委员会批准(wydw2016-0266)，动物许可证号：SYXK(浙)2021-0017。

    1.1.2 细胞：大鼠心肌细胞系H9C2购自上海生物化学和细胞生物学研究所。在37℃，5%CO2的细胞培养箱中使用低糖完全培养基(DMEM1g/L)(含10%胎牛血清和1%青、链酶素混合液)培养细胞。

    1.2 主要设备与试剂 血糖仪(艾科)购自杭州艾康生物技术有限公司，ZS-PT小动物实验跑台购自北京众实迪创科技发展有限公司，高分辨率小动物超声影像系统(Vevo3100)购自加拿大FujifilmVisualSonics公司。GAPDH(#2881S)抗体购自美国CellSignalingTechnology公司，转化生长因子β(transforminggrowthfactor-β, TGF-β)(ER31210)、基质金属蛋白酶9(matrixmetalloproteinase9, MMP9)(ER1706-40)、肌球蛋白重链(myosinheavychain, MyHC)(ET1702-88)抗体购自杭州华安生物公司 ......