陈贤斌，胡琼霜，吕芳芳，卢江龙，李群

    1.温州医科大学附属第一医院神经外科，浙江 温州 325015；2.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院儿童呼吸科，浙江 温州 325027

    垂体腺瘤是颅内常见的肿瘤[1]，主要包括泌乳素腺瘤、生长激素细胞腺瘤和无功能腺瘤等[2]，其中泌乳素腺瘤是最常见的亚型[3]。目前泌乳素腺瘤首选药物治疗，常用治疗药物有溴隐亭(bromocriptine, BRC)和卡麦角林(cabergoline, CAB)，这两种药物能够使80%～90%的患者获益[4]。但仍有10%～20%的患者对药物治疗不敏感、甚至无效，此类患者往往手术治疗后仍然难以恢复正常的泌乳素水平[5]。因此探寻泌乳素腺瘤发生发展机制和解决垂体瘤耐药问题至关重要。先天性肾上腺发育不良症基因-1(dosage-sensitivesexreversaladrenalhypoplasiacongenitaregionontheXchromosome1, DAX-1)基因属于核受体(nuclearreceptors, NRs)家族。最近发现其与肿瘤的发生发展具有密切关系[6]，如乳腺癌[7]、宫颈癌[8]等，但未见其与垂体瘤增殖和自噬的相关研究。本研究主要讨论DAX-1 对垂体泌乳素腺瘤的增殖和药物敏感性的影响及其可能的机制。

    1 材料和方法

    1.1 材料 大鼠垂体瘤(MMQ)细胞系细胞购买于北京中原聚合生物科技有限公司。细胞培养所需的胎牛血清、马血清，以及F12K细胞培养基、青霉素/链霉素双抗购于美国Life公司；TRIzol和RNA抽提试剂购于美国Sigma公司，SYBRGreen、realtimePCRMasterMix、反转录试剂盒购自日本Takara公司；CCK-8检测试剂盒和BCA试剂盒购买于北京碧云天生物有限公司；实时荧光定量聚合酶链反应(real-timequantitativepolymerasechainreaction, RT-qPCR)所需引物由上海生工生物工程有限公司代为设计合成。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养和转染：MMQ细胞培养于Ham’sF-12K(Kaighn’s)培养基中添加12.5%的马血清、2.5%的胎牛血清和1%的青霉素/链霉素，MMQ细胞培养传代于上述培养基，并在37℃、5%CO2环境下培养，待细胞生长至密度约70%时进行转染。转染：将MMQ细胞转至6孔板，每孔约3×105个细胞，24h后用Lipofectamine3000转染试剂将siRNA(由上海吉玛生物技术公司合成 ......