杨志强，黄燕燕，何慧，温媛媛

    舟山医院，浙江 舟山 316021，1.呼吸与危重症科；2.分子生物实验室；3.病理诊断中心

    在世界范围内，肺癌在所有恶性肿瘤中发病率和病死率均居首位[1]，组织学上大部分为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)。尽管治疗方式多样，但预后仍较差[2]。新的分子标志物的研究对于早期发现和预后分析至关重要。

    SWI/SNF是一种复合型核突变小体，以ATP依赖的方式参与基因表达的转录调控，在DNA修复与DNA复制、细胞生长和细胞分化中发挥重要作用[3-5]。SMARCA5属于SWI/SNF家族的一种蛋白，具有解旋酶和ATPase活性[6-10]。SMARCA5通过组蛋白八聚体控制DNA的敏感性，该功能有助于基因表达、DNA复制、DNA修复和染色质高阶结构的维持[6，11-18]。SMARCA5已被证明具有致癌功能，特别是已有研究报道其与肝癌、乳腺癌和胃癌细胞增殖有关[19-21]。然而，SMARCA5在NSCLC中是否表达，及其表达情况如何鲜见相关研究。本研究采用免疫组化、RT-PCR及Western blot检测SMARCA5在NSCLC的表达情况，同时采用MTT法和Transwell法检测肺癌细胞的增殖和侵袭能力，以期阐明SMARCA5在NSCLC发生发展中的生物学作用。

    1 材料和方法

    1.1 标本来源与患者资料 收集2009年1月1日至2010年12月31日舟山医院住院患者131例肺组织标本。根据世界卫生组织肺癌组织学分类标准(2015年)，分为47例肺鳞癌和84例肺腺癌。所有入组患者均行根治性手术切除，未行化疗或放疗。新鲜组织标本用4%中性甲醛固定，石蜡包埋，进行组织切片。常规染色采用HE染色。入组患者的肿瘤采用国际抗癌联盟(2009年)的TNM分期系统进行分期。本研究经舟山医院伦理委员会批准。对患者进行门诊和电话随访。生存时间是从手术日期到因复发/转移死亡日期或最后一次随访日期。本研究随访数据截止日期为2016年12月31日，1例患者失访。

    1.2 主要试剂 S-P免疫组织化学检测试剂盒(福州迈新生物技术公司)；SMARCA5抗体、SMARCA5 siRNA(hSNF2H siRNA)(美国Santa Cruz公司)；β-actin抗体(北京中杉金桥生物技术有限公司)；Lipofectamine 2000(美国Invitrogen公司)；TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0试剂盒(大连TaKaRa公司)；MTT增殖试剂盒(美国Sigma公司) ......