胡大利，曹卫红，朱莉莉，仇灵江，林威钢，蔡卫超，杨霖璟，叶超

    温州医科大学附属台州医院 整形美容科，浙江 台州 317000

    脂肪组织分皮下脂肪组织(subcutaneous adipose tissue, SAT)和内脏脂肪组织(visceral adipose tissue, VAT)，它们在形态学和功能学上均存在明显差异。全身过多的脂肪堆积容易导致肥胖、胰岛素抵抗、血脂代谢紊乱、糖尿病和心血管疾病[1]。局部脂肪堆积可影响患者的轮廓及外观，给 部分患者产生自卑等心理问题[2]。近年来随着微创美容技术的发展，冷冻减脂技术越来越多地为大众所接受。然而，因缺乏脂肪微创冷冻减脂模型，所以鲜有冷冻减脂和脂肪冷损伤的相关分子机制的研究。虽已有学者通过冰浆注入猪皮下脂肪研究冰浆减脂疗效[3]，但因冰浆本身成分复杂，难以作为微创冷冻减脂的基础实验模型。本研究拟通过不同低温探针干预条件下，造成SD大鼠腹股沟区皮下脂肪局部冷损伤，以期建立合适的脂肪微创冷冻减脂动物模型，并初步探讨脂肪冷损伤的可能机制。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物：SPF级雄性SD大鼠180只，鼠龄6～8周，体质量(250±50)g，购自上海斯莱克实验动物有限公司，动物许可证号：SCXK(沪)2017-0005。动物饲养场所为浙江省台州医院实验动物中心，两鼠一笼饲养，严格按照SPF级大鼠饲养要求饲养，实验期间自由饮水摄食。所有动物实验操作均遵循 《实验动物管理条例》以及医院实验动物中心的操作指南，同时经医院动物伦理委员会审核批准。

    1.1.2 实验试剂及仪器：组织包埋机、全自动组织脱水机、石蜡切片机购自英国Shandon公司；荧光显微成像系统购自日本Olympus公司；光学显微镜、倒置荧光显微镜购自日本尼康公司。NF-κB-P65及TGF-β1抗体购自美国Abcam公司；TNUEL试剂盒购自杭州诺扬生物技术有限公司。

    1.2 方法

    1.2.1 实验动物分组及模型建立：180只大鼠随机分为低温组(0 ℃组、-20 ℃组、-40 ℃组、-60 ℃ 组、-80 ℃组)以及室温对照组(Control组)，每组30只。腹腔注射0.6%水合氯醛溶液(0.3 mL/100 g) 麻醉后，订制4 mm直径探针[4]穿刺入腹股沟区皮下脂肪中层 ......