潘天龙，潘骏

    温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 骨科，浙江 温州 325027

    骨肉瘤是最常见的原发性骨肿瘤之一，由于其恶性程度高，侵袭性强，易发生转移，病情进展十分迅速，导致患者的长期生存率不高[1]。因为骨肉瘤细胞对放疗不敏感，所以化疗是骨肉瘤的主要临床治疗方法。寻找一种更加有效且不良反应较小的新型化疗药物则成为了骨肉瘤治疗的主要方向。相关研究表明Wnt/β-catenin信号通路对肿瘤的发生和发展具有一定的调控作用[2-3]。人参皂苷Rh2是人参皂苷中主要活性物质的水解成分之一，具有多种药理活性，其对肺癌、乳腺癌及黑色素瘤等肿瘤细胞均具有较强的抗肿瘤作用[4-5]。然而，对于Rh2在骨肉瘤细胞中具体的抗肿瘤作用的相关研究报导相对较少。因此，本研究旨在探讨Rh2是否可以通过调节GSK-3β/Wnt双信号通路抑制骨肉瘤细胞的增殖、侵袭、迁移并诱导其凋亡，为骨肉瘤的临床治疗提供新的思路。

    1 材料和方法

    1.1 试剂 人参皂苷Rh2购于北京Solarbio科技有限公司；MMP2、MMP9、E-cadherin、Bcl-2、Bax、PARP均购自美国Cell Signaling Technology公司；Cyclin D1、GSK-3β、β-catenin、C-myc均购自美国Abcam Technology公司；胎牛血清、DMEM基本培养基等均购于美国Gibco公司。

    1.2 细胞培养 人骨肉瘤细胞株U2OS和MG63购自上海基因化学有限公司。U2OS和MG63骨肉瘤细胞均在含有10%的胎牛血清，1%青、链霉素双抗的DMEM培养基中培养，培养箱中的条件为37 ℃，5% CO2。

    1.3 细胞活性检测 用不同浓度的Rh2(0、35、70和100 μmoL/L)处理U2OS和MG63骨肉瘤细胞24和48 h ......