孔鸿儒，俞浩辉，陈格尔，陈咨苗，戴胜杰，孙学成，金约朋，杨文军，孙洪伟

    1.温州医科大学附属第一医院 肝胆胰外科，浙江 温州 325015；2.温州医科大学 第一临床医学院(信息与工程学院)，浙江 温州 325035；3.温州医科大学附属第一医院 内分泌科，浙江 温州 325015；4.温州医科大学附属第一医院 消化内科，浙江 温州 325015

    尽管近年来重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)的疗效有所提高，但病死率高、住院时间长、并发症多、医疗费用高昂等治疗现状仍未见显著改观[1]。作为一种非恶性肿瘤性疾病，10%～20%的病死率仍难以接受。SAP患者的临床表现一般为系统性炎症反应综合征(systemic inflammatory reaction syndrom, SIRS)，而SIRS产生的炎症因子会攻击富血供的靶器官，随之产生多器官功能障碍(multiple organ dysfunction syndrome, MODS)，而MODS是SAP最主要的直接死 因[2]。单核-巨噬细胞是参与SAP病理生理过程中的主要炎症细胞之一[3]，急性胰腺炎炎症反应初期，单核-巨噬细胞和中性粒细胞在黏附分子作用下，从血液迁移至胰腺间质，单核细胞趋化因子蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)、巨噬细胞炎性蛋白-1α(macrophage inammatory protein 1α, MIP-1α)、CC类趋化因子-5(CC chemokine ligand-5, CCL5)参与活化单核细胞，随之这些浸润细胞参与产生不同的细胞因子和炎症介质，产生级联反应，致使胰腺局部炎症加重，而炎症因子进入血液影响其他器官如肺、肝脏、脾等。因此，抑制巨噬细胞活性，可以从SAP-SIRS发生的源头上阻断此炎症级联反应，对治疗急性胰腺炎具有 重要的价值。颗粒酶(granzyme)是一种丝氨酸蛋白酶，存在于细胞毒淋巴细胞和自然杀伤细胞的胞浆内。凋亡过程中，颗粒酶和穿孔素(pore-forming protein, PFP)释放到靶细胞附近，在PFP作用下颗粒酶进入靶器官，诱导含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase8)活化，激活RIP1参与的细胞凋亡[5]。基于颗粒酶B(granzyme B, GRB)有效的凋亡诱导作用，本研究旨在探索GRB-PFP是否能有效影响巨噬细胞活性，减轻胰腺炎模型的炎症反应。

    1 材料和方法

    1.1 主要材料 人单核巨噬细胞系(TPH-1)购于中国科学院上海细胞所 ......