孟伟阳，吴芳芳，金灿，陈大庆

    温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 急诊医学科，浙江 温州 325203

    糖氧剥夺再灌注损伤(oxygen glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)是创伤性颅脑损伤进展的重要机制之一。线粒体对于维持细胞生长发育、细胞稳态、维护正常能量代谢、细胞内钙离子稳定起着重要作用。线粒体损伤后内皮细胞的通透性增加、网络结构破坏、ATP产生障碍，随着线粒体膜破裂，凋亡蛋白被释放到胞质中，激活凋亡信号通路导致细胞死亡[1-3]。因此，有效地保护线粒体功能能够减少OGD/R损伤后的内皮细胞凋亡。自噬在细胞生长发育、分化增殖、稳态中起到重要作用。自噬能够清除损伤的细胞器和蛋白质促进内皮细胞存活，且自噬会造成细胞过度的自我消化导致自噬性死亡[4]。研究表明OGD/R损伤后能够导致自噬水平显著上升。PENG等[5]发现抑制ATG3基因能够抑制自噬，减轻OGD/R损伤后脑微血管内皮细胞的损伤，也能减少OGD/R损伤后炎症反应。LI等[6]发现使用雷帕霉素或碳酸锂激活自噬后能够修复OGD/R损伤后脑微血管内皮细胞的屏障。铜-二乙酰-2(N4-甲基氨基硫脲)[copper-diacetyl-2(N4-methylthiosemicarourea)，Cu-ATSM]，因其能够在缺氧的组织中聚集的特点被作为正电子发射断层显像剂，应用于检测各种缺血性疾病，如心肌缺血、脑卒中、肿瘤等[7-9]。有研究表明Cu-ATSM具有改善帕金森动物模型的运动和认知功能，减少黑质细胞的丢失，增加多巴胺代谢等作用[10]，但至今仍鲜见报道其对OGD/R损伤后内皮细胞的保护作用。本研究拟探讨Cu-ATSM对内皮细胞OGD/R损伤后线粒体功能的保护作用及其潜在的分子机制。

    1 材料和方法

    1.1 细胞处理及分组 人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs，h055，上海Sciencell公司)使用高糖完全培养基(含10% FBS、100 U/mL青霉素和100 U/mL链霉素)37 ℃，5% CO2培养 ......