基于扩增子和宏基因技术探讨去卵巢大鼠肠道菌群的变化
多糖,物种,1材料和方法,2结果,3讨论
丁冰倩,徐琳琳,王雪嫄,赵欣,王艳,傅金英,21.河南中医药大学,河南 郑州 450002;2.河南省中医院 妇产科,河南 郑州 450053
围绝经期是妇女自生育期的规律月经过渡到绝经的时期,此期主要表现为月经不规则、生殖器官萎缩、烘热汗出、情绪不稳定、血压易波动等,这些临床表现被称为围绝经期综合征(perimenopausal syndrome, PMS)[1]。随着我国老龄化社会的到来,人口平均寿命的增加,大部分女性绝经后还要生存很长一段时间,她们绝经后的身心健康和生存质量值得引起广泛关注。
肠道菌群是人体最重要、最庞大的微生态系统,其基因组总和比人类多100倍[2-3],机体的胃肠道中定植着大量的菌群,肠道菌群在机体代谢过程中起着重要作用,被称为“代谢器官”[4]。肠道菌群与机体互利共生,参与机体的脂质代谢以及机体免疫,并且肠道菌群的改变能够影响脂质和胆固醇的代谢,进而影响机体疾病的发生发展[5]。作为人体组成部分之一的肠道菌群,与PMS关系密切,可能和肠道有益菌群与腐败菌群比例发生变化有关[6]。
本研究旨在从去卵巢大鼠模型出发,通过去卵巢大鼠模型模拟围绝经期女性,探讨围绝经期大鼠与正常大鼠肠道菌群的差异,为临床认识及治疗PMS提供参考价值。
1 材料和方法
1.1 材料 12 只8 周龄SPF级SD雌性大鼠,购自华兴实验动物养殖场[动物许可证编号:SCXK(豫)2019-0002],饲养于河南中医药大学中心实验室;麻醉用品:水合氯醛(天津大茂化学试剂厂);造模术后抗感染药物:注射用青霉素钠(160万IU,国药准字:H13020655,华北制药股份有限公司)。ELISA试剂盒;全自动生化分析仪(深圳雷杜生命科技,设备型号:chemray240);核酸电泳仪(北京六一仪器厂,设备型号:DYCP-32C型琼脂糖水平电泳仪)。Covaris超声波破碎仪(Massachusetts,美国;设备型号:Covaris S2 system)。Qubit Fluorometric Quantification(Life Technologies,CA,美国;设备型号:Qubit 2.0)。生物分析仪(美国安捷伦公司;设备型号:Agilent 2100)。PCR仪(Bio-Rad,美国;设备型号:T100PCR)。测序仪(Illumina,San Diego,CA,美国;设备型号:Novaseq 6000)。
1.2 造模方法 12只SPF级SD雌性大鼠适应性喂养3 d,术前禁食不禁水12 h ......
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