潘录录，林苏进，蒋旭坚，陈文煜，章国伟，支英豪

    浙江中医药大学附属温州市中医院，浙江 温州 325000，1.康复科3；2.康复治疗部

    肌萎缩可出现在各种疾病的恢复期，如骨折后制动、脑卒中后瘫痪、肺功能受损后肺活量减少、周围神经损伤后失神经支配等[1]，可导致肌力下降、运动功能减退、胰岛素抵抗、基础代谢率下降等[2-3]，严重影响患者的恢复及日常生活活动能力。目前的研究主要关注长期、慢性的肌萎缩，对于早期、急性期肌萎缩的研究不多。一项研究[4]发现仅在废用早期存在泛素蛋白酶体途径诱导的快速、短暂的肌蛋白降解，随着时间延长这种现象消失，肌蛋白降解率重新回到基础水平，所以中晚期废用性肌萎缩速率反而较早期减低。这项研究为我们打开了一个新视角：既然肌萎缩速率在失神经支配早期更加显著，那么从早期入手研究肌萎缩机制和治疗方法可能具有重要的临床意义。

    目前对于肌萎缩机制的研究主要围绕着肌蛋白合成与降解，IIa类组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDACs)被证明在骨骼肌蛋白降解中发挥重要作用，其中HDAC4与骨骼肌障碍关系密切[5]。HDAC4在细胞质和细胞核之间穿梭，充当转录抑制因子，在细胞核内结合并抑制肌细胞增强因子-2(myocyte enhancer factor 2,MEF2)的转录，从而影响骨骼肌的发育及骨骼肌的再生，HDAC4的细胞定位由激酶和磷酸酶的相互作用控制，蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)和钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(calmodulin-dependent protein kinaseII,CaMKII)是其中的两个典型代表[6]，并且这两者对HDAC4 的细胞定位具有拮抗作用[7-8]。研究表明HDAC4 核内聚集可能是造成肌萎缩的一个重要因素[6]。因此，通过HDAC4的细胞定位来研究早期肌萎缩是一个比较有意义的方向。

    我们前期的研究发现慢性废用性肌萎缩中存在HDAC4的细胞定位异常，而通过电刺激能部分逆转这种改变，同时改善肌萎缩情况[9-10]，但影响HDAC4细胞定位的信号通路尚不清楚。本研究通过观察电刺激对失神经性肌萎缩的影响，分析环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)/PKA信号通路和Ca2+/CaMKII信号通路关键因子的变化，探究这两条信号通路与HDAC4细胞定位之间的关系。

    1 材料和方法

    1.1 主要试剂与仪器 CaMKII抗体(4436S，美国CST公司)、PKA抗体(5842S ......