MiR-152-3p靶向调控KLF4促进结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭
结果显示,细胞周期,1材料和方法,2结果,3讨论
赵建国,朱晓灵,金学英,江黎明,李振军,陈遐林绍兴市人民医院 浙江大学绍兴医院,浙江 绍兴 312000,1.肿瘤内科;2.肛肠外科
结肠癌(colon cancer, CC)是常见的胃肠道恶性肿瘤,是癌症相关死亡的第二大原因[1]。据统计,CC的发病率和病死率自2000 年以来总体呈下降趋势,但在50岁以下的年轻人群中却持续上升[2]。因此,CC依然是严重威胁人类身体健康的恶性肿瘤之一,需要进一步探究其分子机制,制定具有针对性的诊断和治疗策略。
微小RNA(microRNA, miRNA)是一类小的内源性单链非编码RNA,可以通过调控相应mRNA靶标的表达,进而调节众多生物过程,在不同类型肿瘤的发生发展过程中往往都伴随着miRNA的表达异常[3-4]。 miR-152-3p作为一个重要的miRNA,在多种癌细胞的发展过程中起到关键作用,如肝细胞癌[5]、非小细胞腺癌[6]、前列腺癌[7]等。在肺癌中,miR-152-3p作为lncRNA KIF9-AS1的下游靶标,可抑制肺癌细胞对顺铂的敏感性[8]。在甲状腺乳头状癌中,miR-152-3p低表达可促进甲状腺乳头状癌细胞恶性进展,且miR-152-3p通过靶向TGFA发挥作用[9]。此外,有研究报道miR-152-3p在CC中的表达异常[10-11]。但有关miR-152-3p在CC中是促癌因子还是抑癌因子的结论却不完全一致。Krüppel样因子4(Krüppellike factor 4, KLF4)是一种锌指转录因子,在多种癌症中差异表达[12-13]。KLF4同样在不同癌种中发挥促癌或抑癌作用[14-15]。在CC中,KLF4对CC细胞耐药性产生影响[16]。但miR-152-3p对CC细胞表型的影响是否与KLF4有关,还需进一步探究。因此,进一步研究miR-152-3p在CC中的分子机制,明确其在CC中的作用,具有一定意义。
本研究通过调控miR-152-3p及其靶基因在CC细胞中的表达,进一步探究miR-152-3p对调控CC细胞的增殖、迁移和侵袭过程的分子机制,明确其在CC细胞中的影响。
1 材料和方法
1.1 主要材料与试剂 人正常结肠上皮细胞 CCD841CON(BNCC338086)、人CC细胞系HCT116(BNCC287750)、SW620(BNCC337664)、SW480(BNCC100604)均购自北京北纳生物科技有限公司,胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)、链霉素、青霉素、Lipofectamine 2000、TRIzol试剂、结晶紫均购自美国Thermo Fisher公司 ......
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