李智敏 刘淑华

    (黑龙江省哈尔滨市第四医院老年病科 150026)

    扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy，DCM)是以心脏扩大，心肌收缩功能障碍为主要特征的原因不明性心肌疾病。目前发病机制尚不清楚，有文献报道细胞凋亡在扩张型心肌病的发生中起着重要作用，且与死亡率呈密切相关[1]。细胞凋亡三个主要的信号转导通路:(1)线粒体通路;(2)死亡受体通路;(3)内质网通路，这些都与钙密切相关。据报道心肌细胞内钙超载见于多种心脏病理状态，如扩张型心肌病[2.3.4.5]。

    钙敏感受体(calcium-sensing receptor，CaSR)是G蛋白耦联受体的C家族成员。CaSR主要存在参与钙稳态调节的组织器官如甲状旁腺、肾脏、骨组织、胃肠道，在心血管系统[6]也有表达。已经证实，在心血管系统Ca2+通过CaSR发挥第一信使作用[7]。CaSR激活通过G蛋白-PLC-IP3通路引起细胞内钙增加，参与心肌钙稳态调控，而心肌细胞钙稳态对心肌功能至关重要[8]。尽管国内外学者对CaSR在心血管领域的作用进行了一些研究，但CaSR在DOX诱导的DCM中的表达情况未见报道。本研究拟通过对DOX诱导的大鼠DCM形成过程中心脏功能、超微结构变化以及CaSR的表达的检测，探讨DOX诱导的大鼠DCM发生的可能机制。

    1 资料与方法

    1.1 一般材料

    1.1.1 实验动物 健康雄性Wistar大鼠40只，体重220g±20g。

    1.1.2 主要试剂 Western及IP细胞裂解液、BCA蛋白定量试剂盒、DOX(Pfizer Italia S.r.l.)、分离胶浓缩液、浓缩胶浓缩液、电泳缓冲液、转移缓冲液、Anti-CaSR(Alpha Diagnostic International，USA)、Anti- GAPDH(Santa)、羊抗兔IgG-FITC、马抗鼠IgG-FITC等。

    1.1.3 主要仪器 高速低温离心机(LD5-2型);电泳仪;光学显微镜，GE Vivid7彩色多普勒超声仪;酶标仪。

    1.2 方法

    1.2.1 扩张型心肌病模型的建立 本实验参照腹腔注射阿霉素的实验方法 ......