陈海军 孙梓程 刘 岩 由光玉 洪东宁

    (南通市第六人民医院普外科，江苏 南通 226000；2.牡丹江市第一人民医院，黑龙江 牡丹江 157001)

    本研究以临床肿瘤标本为研究对象，通过实时荧光定量PCR 及West-bloting 的方法对胃癌组织中Wnt 信号通路中β-catenin 蛋白的表达状况与临床病理因素之间的关系进行分析，探讨其在胃癌发生发展中的作用机制，为临床治疗提供可能的治疗靶点。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 随机选取我院手术切除的胃癌标本32 例为研究对象，其中男19 例，女13 例，中位年龄56 岁(39～79 岁)，所有患者术前均未进行新辅助化疗。胃底贲门部肿瘤4 例，胃体部肿瘤8 例，胃窦部肿瘤20 例；pTNM 分期Ⅰ期，Ⅱ期共24 例，Ⅲ期，Ⅳ期共8 例；无淋巴结转移12 例，伴有胃周淋巴结转移20 例；低度分化8 例、中等分化16 例、高分化腺癌8例。取胃癌组织和距癌肿边缘5 cm 的远癌组织后迅速-80 ℃冻存并尽早检测。

    1.2 实验仪器和试剂 ECL 发光试剂盒；KAPA SYBR FAST qPCR Kit；抗人β-catenin 单克隆抗体、内参GADPH 抗体、二抗SP 免疫组化试剂盒；TRIzol试剂、逆转录试剂盒；全蛋白提取试剂盒、BCA 蛋白定量试剂盒；BIO-RAD CFX96 实时定量PCR 仪；垂直电泳和水平电泳。操作步骤按说明进行。

    1.3 方法 (1)RNA 提取及纯度测定：将得到胃癌组织及远癌组织分别称重，切碎 ......