Rab4蛋白参与DC细胞内源性抗原递呈
摘要:目的 通过实验研究,观察Rab4在DC细胞中产生的影响,对卵白蛋白的细胞株稳定表达,并研究这些影响对其内源性产生的递呈抗原。方法 在研究初期,要构件一个内部含有OVA蛋白基因的质粒,这种质粒的英文名称为pLentimycVOA,属慢病毒。接下来,要使用沉淀法来制备慢病毒,这里使用的是DNA-磷酸钙试剂,通过沉淀转染293FT细胞。接着要用病毒去感染DC-VOA,并及时用流行细胞术的方式对其感染率进行检测;检测结果出来后,应使用显微镜(这里使用的是激光共聚焦型)观察Rab4突变体的定位与表达,最后再用T细胞杂交瘤(一种能够识别肽复合物的物质)来对B3Z进行检测,之后就可以进行抗原递呈的观察了。结果 DC-OVA细胞在慢病毒的影响下会被高效感染,经过感染的Rab4会产生一定程度的突变,在DC-OVA中,这些突变能够被稳定表达出来,主要在细胞膜四周的囊泡结构中不均匀的分布,因此,Rab4蛋白参与到DC细胞中,会对其内源性抗原递呈产生正相关性的影响。结论 通过观察,能够清楚地观测到Rab4的突变体在DC细胞中的分布情况,证实Rab4蛋白通过对其活性状态的改变能够对DC细胞的内源性抗原产生影响,并且这种影响呈现正相关的递呈状态。
关键词:Rab4蛋白;DC细胞;抗原递呈
蛋白酶经过消化后,会变为多肽,与内质网里面的MHG-1类型的分子发生反应,形成一种复合物,并转运到细胞膜中。生物体的免疫系统能够自动对细胞膜中存在的非自身分子进行识别,这里就是识别MHC-1類分子,对异常细胞进行清除 ......
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