刺五加皂苷对人乳腺癌细胞增殖以及侵袭相关分子表达的影响(2)

http://www.100md.com 2013年9月1日 戴先鹏 颜亚平 申昕 邓礼明 熊国祚

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    参见附件。

     1.2.7 PKC活性的测定 根据参考文献提供的原理，利用一个能被PKC磷酸化的假底物间接测定PKC同工酶活性[9]。即，细胞处理结束后用4℃ PBS洗涤2次，1000 r·min-1离心后加入1ml缓冲液(50 mmol/L Tris-HCl，50 mmol/L β-巯基乙醇，10 mmol/L苯甲脒，5 mmol/L EDTA，1 mmol/L PMSF，pH 7.5)中重悬浮细胞。测定上清浓度后，根据试剂盒(EMD Biosciences)提供的方法测定PKC的相对激酶活性(λ=492nm)中进行悬浮。测定蛋白质浓度。根据商家的说明分析PKC的活性。

    1.3 统计学分析

    各分组所得计量数据采用均数±标准差(±S)表示，用SPSS10.0软件处理数据，组间比较采用方差分析。检验水准α=0.05， p<0.05有统计学意义。

    2 结果

    2.1 ASS对MCF-7细胞活性的影响

    如图1所示，125、250、500μg/mL的ASS能以剂量依赖性方式抑制MCF-7细胞的活性，当ASS浓度为500μg/mL时，与对照组相比，MCF-7细胞活性降低至51%。此外，ASS也能促MCF-7细胞LDH的释放(图2)。其中500μg/mL ASS诱导产生LDH含量达(267.12±21 ......

    http://www.100md.com/html/paper/2095-9753/2013/09/03-1.htm

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