骨质疏松患者外周血差异表达miR-19b调控骨髓间充质干细胞成骨分化的作用机制研究*
骨质疏松症,1材料与方法,1患者入组及标本收取,2RNA测序及miRNA差异表达谱分析,3miRNA靶点预测及功能分析,4miRNA敲低和过表达,5实时荧光定量PCR(qRT
彭松林 王尚 陈高扬(深圳市人民医院脊柱外科,暨南大学第二临床医学院,南方科技大学第一附属医院,广东深圳 518020)
骨质疏松是最为常见的年龄相关性骨科疾病,特点是骨量减少,骨微结构改变,进而导致骨脆性和骨折风险增加[1-3]。当前全球范围内约有2 亿骨质疏松症患者,其中890 万并发骨折症状,严重降低了患者的生活质量并大幅增加死亡风险[4]。骨质疏松症的病因包括女性绝经后状态、年龄增长、性腺功能减退或卵巢早衰、类风湿关节炎、缺钙、吸烟、酗酒和长期使用某些药物(如糖皮质激素、抗凝剂、抗惊厥药、癌症化疗药物等)[5-7]。随着人口老龄化的加剧,骨质疏松症发病率逐年升高,成为当前世界性的难题。骨质疏松症主要由于骨代谢过程中骨形成和骨吸收失衡所致,而骨髓间充质干细胞在骨修复过程中发挥重要作用[2,8,9]。深入了解骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的调控机制,有助于揭示骨代谢过程中新的作用机制和靶点,为骨质疏松症的病理机制提供新的理论依据,为骨质疏松症预防和治疗提供全新的策略和思路。
微小RNA(miRNA)被证实可在转录后通过抑制目标基因调控疾病进展[10-12],已有研究报道miRNA在骨质疏松中差异表达且发挥重要调控作用[13,14]。然而,miRNA 在骨质疏松性椎体骨折患者外周血中的表达谱变化尚不明确,血浆中差异表达miRNAs在成骨过程中的作用尚不清楚。本研究检测伴有或不伴有椎体骨折的骨质疏松症患者相对于健康对照的miRNA 差异表达谱,通过生物信息学分析筛选出成骨相关miRNA 并进一步通过细胞实验验证其对BMSCs 成骨分化的调控作用。目的是为绝经后骨质疏松症的诊断和治疗提供可靠的生物标志物和潜在的治疗靶点。
1 材料与方法
1.1 患者入组及标本收取
纳入本研究的所有受试者均为就诊于深圳市人民医院脊柱外科的女性患者,患者年龄60~70岁。按骨密度值(T 值)和是否伴有骨折分为3 组:骨量正常组(T≥-1.0 SD),单纯骨质疏松组(T≤-2.5 SD),骨质疏松伴骨折组(T≤-2.5 SD),每组6 例。以上各组均排除患有其他器质性病变(如高血压、糖尿病、类风湿关节炎、骨坏死等)的患者 ......
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