骆玉霜，格日力，沈存芳，李 燕，范宝华

    (1.青海大学高原医学研究中心，青海 西宁 810001；2.青海大学附属医院肿瘤内科，青海 西宁 810001)

    低氧下Crocin联合顺铂对人胃癌BGC-823细胞增殖的影响*

    骆玉霜1，2，格日力1△，沈存芳2，李燕2，范宝华2

    (1.青海大学高原医学研究中心，青海 西宁 810001；2.青海大学附属医院肿瘤内科，青海 西宁 810001)

    摘要目的探讨藏红花素联合顺铂(Crocin+DDP)低氧下对人胃癌细胞增殖的影响。方法实验分对照组、C1组、C2组、Z1组、Z2组、C1+Z1组、C1+Z2组、C2+Z1组、C2+Z2组。在低氧环境下培养人胃癌BGC-823细胞，经Crocin、DDP处理后，采用高倍显微镜观察细胞形态变化；各组药物处理胃癌BGC-823细胞后，利用MTT检测细胞增殖情况。结果1)从形态学观察，2%低氧下BGC-823细胞大量死亡，5%低氧下数量减少，MTT示：低氧下48 h BGC-823细胞OD值低于常氧下。2)低氧下DDP处理BGC-823细胞后从形态学观察：细胞固缩、细胞数量减少。MTT示：低氧条件下C1、C2抑制率(分别为30.2%、52.7%)低于在常氧下抑制率(分别为34.9%、59.4%)，P1.1 主要药品与试剂选择

    Crocin、PDD(Sigma公司)；人胃癌细胞株BGC-823(中科院细胞库)；RPMI-1640培养基(Hyclone)；胎牛血清(Gibco)；MTT粉(上海生物工程技术服务有限公司)；二甲亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO，Sigma)。

    1.2 Crocin溶液的配制

    将1000 mg Crocin粉末溶于20 mL PBS(0.01mol/L、pH=7.2)中，并加入62.5 mg EDTA配成贮存液，4 ℃保存。以PBS稀释至应用浓度。

    1.3 细胞培养

    将人胃癌BGC-382细胞放入含10%胎牛血清和1%双抗的RPMI-1640培养基，并置于细胞培养箱(37℃、5%CO2，饱和湿度)培养。每天观察细胞生长情况，2～3 d换液一次。当细胞生长达到铺满70%～80%时，以0.25%胰蛋白酶消化，通常按照1：3～1：5的比例传代，每周传代两次，当细胞传至8～10代时进行实验。细胞低氧环境培养采用美国Queue多气体细胞培养箱，N2调节孵箱内O2分压 ......