张 莹，文绍敦，童 丽，李永平

    (青海大学，青海西宁810001)

    已有证据表明，性激素分泌紊乱与胰岛素抵抗(insulin resistance，IR)在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome，PCOS)的发展进程中占有重要地位。其中，IR是PCOS重要的临床特征，约50%～70%的PCOS患者存在不同程度的IR[1]。其机制可能与胰岛素受体后信号传导障碍有关，尤其是磷脂酰肌醇 3 激酶(phosphoinositide3-kinase，PI3K)介导的胰岛素信号通路(PI3K/Akt)[2]。中医认为，PCOS属肾、肝、脾三脏功能失调，从而引起肾-天癸-冲任-胞宫轴的异常。本研究应用针刺改善生殖功能障碍联合五子衍宗丸补肾治疗，观察对PCOS-IR模型大鼠生殖内分泌及PI3K/Akt信号通路的影响，探讨其可能作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 动物

    健康清洁级21日龄Wistar雌鼠32只，体质量(55±5)g，由甘肃兽医研究所实验动物中心提供[许可证号:SYXK(甘)2014-0002]，适应性饲养2天。随机分为空白对照组、模型组、二甲双胍组和针药联合组，每组8只。

    1.2 实验药品、试剂和仪器

    主要药品和试剂:脱氢表雄酮(DHEA，上海源叶生物科技有限公司)，注射用油(北亚试剂，国药准字H21024303)，二甲双胍(上海施贵宝，国药准字H20023370)，五子衍宗丸(北京同仁堂，国药准字Z11020188)。空腹胰岛素(FINS)ELISA试剂盒、卵泡刺激素(FSH)ELISA试剂盒、黄体生成素(LH)ELISA试剂盒、雌二醇(E2)ELISA试剂盒、睾酮(T)ELISA试剂盒(北京博奥拓达科技有限公司)。反转录试剂盒、实时荧光定量PCR试剂盒(Takara)。引物(Qiagen)。

    主要仪器:血糖仪(强生稳择易)，低温离心机(5424R，艾本德)，酶标仪(RT-6500，雷杜)，实时荧光定量PCR仪(LightCycler 96)。

    1.3 模型制备方法[3]

    根据Lee MT等的方法，除空白对照组外，其余大鼠项背部皮下注射 DHEA(6mg/100g体重，溶于0.2mL注射用油中)，连续注射20天 ......