赵高宇，马金兰，张瑞霞

    (1.青海大学研究生院;2.青海大学附属医院眼科;3.青海大学附属医院内分泌科)

    视网膜血管性疾病的发病基础为新生血管发生导致的视网膜缺血、血管内皮细胞渗漏等病理改变[1]，新生血管的发生对眼部结构和功能造成的损害是引起视力障碍的重要原因。视网膜新生血管的发展必须依赖缺氧诱导的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)，这是视网膜新生血管形成的一个主要因素。VEGF家族属于血小板源性生长因子(The platelet-derived growth factor，PDGF)超家族，目前由六个不同的成员组成，即VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E 和胎盘生长因子(placental growth factor，PLGF)，VEGF-A在 VEGF家族中所占比例最高[2]。现已明确VEGF-A在视网膜新生血管的形成中的作用机制，但是VEGF-B对血管生成的影响研究一直有争论。本研究应用一种新的视网膜新生血管成模方法，即在模拟低氧环境下观察大鼠视网膜新生血管形成与否，同时观察视网膜VEGF-B的表达情况，综合探讨VEGF-B与低氧诱导大鼠视网膜新生血管的相关性。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及主要试剂

    雄性SD大鼠体重190～250 g，购自南京青龙山动物繁殖场。兔抗VEGF-B多克隆抗体购自英国abcam公司;异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(Fluorescein-dextran，FITC-dextran)购自美国 Thermo公司;大鼠VEGF-B酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒购自中国DLDEVELOP公司;离心柱式组织RNA提取试剂盒、反转试剂盒及实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR，RT-PCR)相关试剂盒购自中国天根生化科技有限公司。

    1.2 分组和模型

    所有动物遵循视觉和眼科学研究学会(Association for Research in Vision and Ophthalmology，ARVO)关于眼科动物的处理规定，购回后在青海大学高原医学研究中心饲养，大鼠分为四组:低氧空白组、低氧药物组、低氧药物对照组和常氧对照组，每组12只。低氧处理大鼠置于青海大学医学院低压氧舱(中航工业风雷公司，模拟海拔高度5 000 m，大气压力50±2kPa，氧气含量21±1%)。低氧药物组大鼠在进舱前一天在玻璃体腔注射兔抗VEGF-B多克隆抗体[0.2%(W/V) ......