许 航，王海久，姚丹华，李幼生*，樊海宁*

    (1.青海大学附属医院肝胆胰外科，青海 西宁 810000；2.青海省包虫病研究重点实验室，青海 西宁 810000；3.上海交通大学医学院附属第九人民医院普外科，上海 200011)

    and the concentration of IFN-γ and IL-6 in the supernatantof IEC-6 by MTT

    如今，越来越多关于维生素D在肠道中的生理作用被人们所重视。由于维生素D的生物学作用都是通过维生素D受体(Vitamin D receptor，VDR)来实现的，活性维生素D可以激活VDR，因此我们认为活性维生素D的作用等同于VDR的作用。近几年来的研究发现，VDR是一个胃肠道的保护性受体，并广泛分布于人体各个器官，具有抗炎作用[1]。动物实验证实，小肠切除术后，在膳食中添加维生素D，可以促进隐窝的分化和肠上皮细胞的增殖[2]，也可以维持肠上皮细胞的稳态[3]。同时，VDR下调可以减轻大鼠结肠炎症[4]。但目前维生素D对缓解肠道炎症的具体机制不明，因此，本实验通过体外建立LPS诱导的大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6炎症模型，观察VDR对该模型的影响，探究其可能存在的机制。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与仪器

    IEC-6 细胞购于富衡生物公司；培养用胎牛血清(Fetal Bovine Serum，FBS)购于Gibco公司；DMEM培养基、胰酶、脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)、1，25二羟维生素D3(1，25-dihydroxy-vitamin D3，1，25D3)购于Sigma公司；INF-γ、IL-6 ELISA试剂盒购于联科生物；RNA提取试剂盒GeneJET RNA Purification Kit购于Thermo公司；cDNA逆转录试剂盒购于Takara公司；PowerUp SYBR Master Mix购于ABI公司；RIPA细胞裂解液、BCA蛋白浓度定量试剂盒购于代轩生物公司；Claudin-1一抗购于Abcam公司；Occludin一抗购于Novus公司 ......