小鼠死后环状 RNA的降解规律及其用于死亡时间推断的适用性
内参,核酸,1材料与方法,1实验仪器与试剂,2实验材料,3实验方法,4统计学方法,2结果,1内参筛选结果,2单因素方差分析结果,3线性回归分析结果,3讨论
郝尔娃,吴 岳*,杨应忠,马启宁,赵洪乾,于 聪(1.青海大学医学院,青海 西宁 816000;2.青海省海西州公安局油沙山分局,青海 茫崖 816400)
法医病理学中死亡时间(Post Mortem Interval,PMI)的推断一直没有明确统一的计算方法,是法医尸检工作中的一大难点。
应用核酸推断死亡时间是法医学研究领域中的热点,其中环状RNA(circRNAs)作为一类新近发现的分子,在法医学中的应用还在研究阶段,尚未有太多的研究资料。本研究将使用q-PCR技术检测小鼠小脑中环状RNA相对表达含量,分析circRNA用于推测PMI的实用价值。
1 材料与方法
1.1 实验仪器与试剂
仪器:ABI 7500 RT-qPCR仪(美国ABI公司),UVP 凝胶成像系统(UVP公司),5415D高速离心机(德国Eppendorf公司),NanoDrop 2000c核酸分析仪(美国Thermo公司),BIO-RAD PCR扩增仪(美国伯乐公司),DYY-6B型稳压稳流电泳仪(北京六一仪器厂),鼎池12 L双核制冷医用恒温箱(艾威雷博公司)。
试剂:天根总RNA提取试剂盒(天根生化科技公司),PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser(TaKaRa宝日医生物技术公司),TIANGEN GeneGreen核酸染料(北京天根生化科技公司),TIANGEN SuperReal PreMix Color(SYBR Green)SuperReal彩色荧光定量预混试剂(北京天根生化科技公司)。
1.2 实验材料
成年雄性昆明小鼠50只 ......
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