刘军莉,刘川川,李润乐,刘慧慧,崔 森*

    (1.青海大学附属医院,青海西宁810001;2.青海大学医学院,青海 西宁810001)

    阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)是一种获得性、进行性认知损害足以影响日常生活能力的神经退行性病变,是导致痴呆的最主要的原因,占50%～75%[1]。AD的基本特征是淀粉样斑块(Aβ)和神经纤维缠结(NFTs)[2],此外可见营养不良的神经突起、星形胶质细胞增生及小胶质细胞的活化等[3]。近年来,虽然研究者们对AD的理解有了很大的提高,但具体机制仍无法完全阐明。普遍认为,Aβ沉积引起神经炎症,导致神经元损伤,从而引发AD。由于AD起病缓慢、病程长、病因复杂,目前仍无确切的治疗药物和方法。有研究显示,食用发酵乳制品,如酸奶和低脂奶酪,可能会降低老年人认知能力下降的风险,并有助于预防AD[4-6]。藏区酸奶是由青海藏区农牧民沿用传统方法手工制作的发酵食品,通常以鲜牛奶为原料,用天然乳酸菌作发酵剂,在37℃左右条件下发酵8～10 h。已有研究表明藏区牦牛酸奶具有抗氧化活性、降低胆固醇以及提高免疫力的作用[7]。在青藏高原,发酵乳是藏族人日常饮食的重要组成部分[8]。我们推测藏族人群AD患病率低除了与遗传背景、生活习俗等有关以外,可能与长期进食传统手工发酵乳有关。本研究观察长期给予藏区发酵乳对阿尔茨海默病模型小鼠认知功能的影响。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物

    两月龄SPF级雄性B6C3系APP/PS1双转基因小鼠,体重(20.03±3.52)g;两月龄SPF级雄性B6C3系野生型小鼠,体重(19.86±3.37)g,均购于江苏集箤药康生物有限公司[许可证号：SCXK(苏)2018-0008]。置于SPF级动物房中单笼饲养,自由摄食(水)。本实验操作严格按照国家《实验动物管理条例(GB14923-2010)》执行。所有动物实验经青海大学动物保护与研究伦理委员会审核和批准。

    1.1.2 菌种与发酵乳

    L.helveticus(CCTCC AB 2010205)购自中国微生物保藏管理中心。藏区发酵乳样品来自青海省海南藏族自治州(海拔3200米)手工制作发酵乳的牧民家庭。用无菌吸管分多次吸取60～100 mL样品装入无菌的玻璃瓶中并以塑料薄膜密封,用低温储藏箱带回实验室,使用20%甘油保存于-80℃冰箱中备用。

    1.1.3 主要仪器和试剂

    MRS购自北京索莱宝科技有限公司;BCA蛋白浓度测定试剂盒购自碧云天生物工程有限公司;免疫组化试剂盒购自北京中杉金桥生物有限公司;Aβ、TLR4、Myd88、NF-κBp65 蛋白抗体均购自英国艾博抗公司;Aβ1-42酶联免疫吸附试剂盒购自武汉伊莱特生物科技公司 ......