牦牛和藏羊肺表面活性物质磷脂的组成和含量※
氧分压,材料与方法,1实验动物选择,2肺表面活性物质的制备,3肺表面活性物质中脂质成分的提取,4磷脂分析方法的建立,5统计学处理,结果,1磷脂检测方法的精密度,重现性和稳定性,2牦牛和藏羊肺表面活性物质中磷脂的成分和
徐 波,李永晓,安志芳,王志洁,李吉梅,高聪慧,魏 莲,魏登邦*(1.青海大学生态环境工程学院;2.省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室,西宁 810016)
牦牛(Bosgrunniens)和藏羊(Ovisaries)尽管生活在高海拔低氧环境中,但它们的动脉氧分压和血氧饱和度显著高于黄牛和绵羊,静脉氧分压和血氧饱和度显著低于黄牛和绵羊[1-3],说明牦牛和藏羊不仅能够从低氧环境中有效获取氧,而且其组织能够有效利用氧。氧的有效利用与肺组织气体交换的总面积大小有关,是否与肺表面活性物质磷脂的组成和含量密切相关尚不明确。本研究拟通过分析牦牛和藏羊PS的组分和含量特征,进一步探讨它们适应低氧环境的生理机制。
1.材料与方法
1.1 实验动物选择
选择青海海北刚察地区(海拔3200m,当地氧分压为14.31Kpa,含氧量为198g/m3)的牦牛和藏羊各10只。动物处理按照国家《实验动物管理条例(GB14923-2010)》执行。
1.2 肺表面活性物质的制备
实验动物宰杀完毕后直接取出肺组织样品并称重。肺组织按照每克肺2 mL的标准分3次缓慢注入37 ℃生理盐水,充分灌洗肺泡后抽出灌洗液。将灌洗液离心(4℃,10000r/min)10 min,取上清液置-50 ℃真空冷冻干燥机干燥(GLZY-0.5B,上海浦东冷冻干燥设备有限公司)。将冻干粉置-20 ℃冰箱冻存。
1.3 肺表面活性物质中脂质成分的提取

1.4 磷脂分析方法的建立
1.4.1 标准品储备液的配置

1.4.2 样品检测
1.4.3 精密度、重现性和稳定性实验
取LPPC、DPPC、PG、PSe和PI的磷脂混合标准品溶液分6次进样分析 ......
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