王 玲,王玉清,王兆芬#,姚 杰,程国栋,史发鹏,冶庚祉,黄秋丽,曹雪平,李 泽

    (1.青海大学医学院,西宁 810001;2.青海省第四人民医院,西宁 810007)

    对肺结核患者进行精准化治疗需要明确痰检阳性与阴性活动性肺结核患者的肠道菌群差异情况。为了探究青海成年痰检阳性与阴性活动性肺结核患者的肠道菌群差异性,本研究利用16S rDNA测序技术开展相关研究。

    1 对象与方法

    1.1 对象

    本研究依据《肺结核诊断标准(WS 288-2017)》,选取青海省第四人民医院痰检阳性活动性肺结核患者14例作阳性组、痰检阴性活动性肺结核患者12例作阴性组。研究对象年龄范围为18-85岁。痰检阳性组与阴性组肺结核患者基本情况相似。研究方案通过青海大学医学院伦理委员会审核。

    1.2 方法

    1.2.1 粪便采集

    在抗结核治疗前采集3～10 g粪便置-80℃冰箱保存。使用QIAamp PowerFecal DNA Pro Isolation Kit试剂盒提取细菌基因组DNA,经琼脂糖凝胶电泳确定基因组DNA完整性后,使用Nanodrop 2000平台(Thermo Fisher Scientific,美国)检测基因组DNA质量(浓度为20 ng/μL,总量≥500 ng,OD260/280=1.8～2.0)。

    1.2.2 16S rDNA基因测序

    使用PCR扩增引物对细菌总DNA中的16S rDNA基因的V3-V4区进行扩增。16S rDNA V3-V4区的扩增引物序列见表1 ......