[摘要] 目的 探讨加载机械张力参数为拉伸幅度的10%时，机械张力的加载时间对正常皮肤成纤维细胞(NSFB)机械传导效应的影响。方法 体外培养人体NSFB和增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)，NSFB和HSFB分别设实验组和对照组，实验组加载机械张力参数为拉伸幅度10%，对照组不加载机械张力。在加载周期性机械张力3、5、7 d时，用CCK-8检测各组细胞增殖能力，用Real-time PCR法检测各组细胞Integrin-β1、P130Cas基因表达水平，用Western-Blot方法检测细胞Integrin-β1、P130Cas蛋白表达水平。结果 加载机械张力5 d时，NSFB实验组与HSFB对照组比较，细胞增殖、P130Cas和Integrin-β1的表达水平差异均无统计学意义(Z=-0.218，F=0.591、0.079，P>0.05)；加载3、7 d时，NSFB实验组与HSFB对照组比较，细胞增殖、P130Cas、Integrin-β1表达差异均有统计学意义(Z=-5.294～-2.411，F=34.182～872.148，P<0.05)。结论 拉伸幅度为10%的机械张力加载5 d时，可使NSFB表现出与HSFB相同的机械传导效应。

    [关键词] 成纤维细胞；瘢痕；皮肤；机械感受器；整合素类

    [中图分类号] R329.24；R339.19

    [文献标志码] A

    [文章编号] 2096-5532(2018)03-0313-05

    增生性瘢痕的形成与机械张力密切相关[1]。通过加载适当大小的机械张力，正常皮肤成纤维细胞(NSFB)中的整合素信号通路被激活，细胞机械传导效应增强，细胞增殖与分化改变，最终表现出增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)表型[2-4]。目前，皮肤成纤维细胞力学信号的传导和生化反应机制尚未明确；细胞只有在感受到适当大小、作用时间的机械张力时才会发生明显的信号传导，引起细胞内生化反应。前期研究证实，皮肤成纤维细胞的机械张力加载最佳幅度为10%[5]。为进一步探究使成纤维细胞发生机械信号传导的最佳参数，本实验通过对比不同加载机械张力(加力)时间下NSFB与HSFB的生化反应及细胞增殖能力，探究使NSFB表现出与HSFB相同机械传导效应的最佳时间，确定使成纤维细胞发生机械信号传导的准确实验参数，从而为研究机械张力导致瘢痕形成机制提供实验数据。

    1 材料与方法

    1.1 主要仪器及试剂

    多通道细胞应力加载仪(BF-3001C，美国Flex-cell公司)，6孔弹性基底膜培养板(BF-3001C ......