(郑州大学第三附属医院妇产科,河南 郑州 450052)

    目前关于子宫内膜异位症发病机制尚未完全阐明[1-2]。既往研究已表明，体腔化生、血管转移等均可能引发子宫内膜异位症，而人异位子宫内膜细胞(HEEC)恶性增殖及凋亡能力降低是子宫内膜异位症的主要病理机制[3-4]。因此，深入探究HEEC增殖及凋亡的分子机制有助于提高子宫内膜异位症治疗效果。研究已表明，微小RNA-141(microRNA-141，miR-141)在子宫内膜异位症病人中表达下调，但关于其具体作用机制尚未明确[5-6]。miR-141是微小RNA-141-3p(microRNA-141-3p，miR-141-3p)的前体，关于miR-141-3p对HEEC生物行为的影响及其机制研究相对较少。已有研究表明，子宫内膜异位症病人中高迁移率族蛋白 B1(HMGB1)的表达水平升高，其可能通过调节新生血管生成而参与子宫内膜异位症发生过程[7]。Target Scan网站预测显示，HMGB1可能是miR-141-3p的靶基因，但miR-141-3p是否可通过靶向调控HMGB1而影响HEEC的增殖及凋亡尚未明确。为此，本研究探讨miR-141-3p表达对HEEC增殖及凋亡的影响，分析其与HMGB1的靶向调控关系及其可能作用机制。现将结果报告如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    2016年2月—2018年10月，选取本院收治的45例子宫内膜异位症病人为研究对象，年龄35～60岁，平均(45.52±5.62)岁。临床分期[8]：Ⅱ期10例，Ⅲ期20例，Ⅳ期15例。所有病人均经手术病理证实为子宫内膜异位症，术前3个月内未服用性激素类药物，于术中切取异位内膜组织。同时，选取同期因妇科良性病变进行子宫切除术的43例病人为对照组，年龄为42～60岁，平均(56.72±7.13)岁。所有病人均经手术病理证实，术中切取正常子宫内膜组织。排除合并其他生殖系统肿瘤者。两组病人年龄、月经周期等相比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经本院伦理委员会批准，病人均知情并签署同意书。

    1.2 实验材料

    DMEM培养基购自美国Hyclone公司；胰蛋白酶和胎牛血清均购自美国Gibco公司；Ⅰ型胶原酶购自上海百赛生物技术股份有限公司；miR-141-3pmimics、miR-141-3p抑制剂(anti-miR-141-3p)及其各自阴性对照试剂均购自广州锐博生物科技有限公司；Lipofectamine2000购自美国Invitrogen公司；Trizol试剂购自北京全式金生物技术有限公司；反转录试剂盒与实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测试剂盒均购自美国Thermo Fisher公司；MTT细胞增殖检测试剂盒购自上海生物工程股份有限公司；Annexin V-FITC/PI检测试剂盒购自武汉艾美捷科技有限公司；双荧光素酶活性检测试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司；RIPA裂解液购自美国Sigma公司；兔抗人Cyclin D1、Bcl-2、P21、Bax抗体购自美国Abcam公司；HRP标记的IgG二抗购自武汉博士德生物工程有限公司；兔抗人HMGB1抗体购自武汉菲恩生物科技有限公司 ......